Part Number: 900038 Issue Level: 1.00
第1章
測定原理､FMS 2 ﾊｰﾄﾞｳｴｱ
1.0 ｸﾛﾛﾌｲﾙ蛍光測定 1FMS 2は､光合成研究の強力な道具であるが､その機能を完全に利用して､最高の動作を達成するには､その測定内容と､背後にある諸原理を理解することが重要である｡以下に､ｸﾛﾛﾌｲﾙ蛍光測定に関する簡単な説明を行う｡より詳しくは､巻末に示す文献を参照されたい｡
ｸﾛﾛﾌｲﾙ蛍光とは？光が ｸﾛﾛﾌｲﾙ分子に吸収されると､その分子の電子配置が､一時的に変化する｡この”励起された”配置は､本来不安定で､幾つかの ﾌﾟﾛｾｽ が､吸収した エネルギーｰ を奪い合う為､短命である｡ （通常 10-8 秒以下)光合成 ｼｽﾃﾑ に於いては､それらの ﾌﾟﾛｾｽ は､2つの ｸﾞﾙｰﾌﾟ に分類出来る：
非光化学 ﾌﾟﾛｾｽ: このﾌﾟﾛｾｽ では､光合成に寄与しない様な形で､光合成機構中のエネルギーｰ を消費する｡通常 エネルギーｰ は､その試料から､赤外放射（熱）と､ｸﾛﾛﾌｲﾙ蛍光として知られる赤 / 赤外放射として､再び放出される｡
この ﾌﾟﾛｾｽ 間の､吸収された エネルギーｰ の奪い合いの為､一方の ﾌﾟﾛｾｽ の消費率が下がると､もう一方の ﾌﾟﾛｾｽ の率が上がる｡即ち､光化学に依る エネルギーｰ 消費が低下すると､非光化学 ﾌﾟﾛｾｽ の熱とｸﾛﾛﾌｲﾙ蛍光にによる エネルギーｰ 放散が増加する｡FMS 2で蛍光放射の変化を測定して､光化学に対する光の利用効率の変化に関する情報を推定出来る｡ (Krause and Weis1991, Govindjee 1995) Emerson等(1932)の研究以来､光合成には､異なったクロロフィルを含むシステムの行う､2つの別々の光化学 ｽﾃｯﾌﾟ のあることが､広く認められている｡その ｸﾞﾙｰﾌﾟ は､ﾌｵﾄｼｽﾃﾑI （PS I）と ﾌｵﾄｼｽﾃﾑII （PS II）と呼ばれる｡実験的には、PS IとPS IIの機能上の違いにより､生理学的温度下で観察される､ｸﾛﾛﾌｲﾙ信号の少なくとも95%は､PS II に関連した ｸﾛﾛﾌｲﾙ分子から誘導されている｡従って､FMS 2の検知する蛍光信号は､吸収された光がPS IIにより、光化学に使われる効率の変化を示す｡
1.2 FMSは､ｸﾛﾛﾌｲﾙ蛍光をどの様に測るのか？
生理的温度では､蛍光のﾋﾟｰｸは､赤色光領域(≒685nm)にあり､800nm辺りの赤外領域まで延びている｡ (Krause and Weiss 1984)
正確な蛍光の判定には､蛍光の波長には感応し､且つ光化学を引き起こすアクチニック光（作用光、或いは励起光）を感知しない検知ｼｽﾃﾑが必要である｡Plant Efficiency Analyzer( PEA)の様な､連続励起光を用いる機器の場合は､光化学反応を起こす作用光には、特別に設計された650nmの光源を使って蛍光に依存する信号を識別している｡ﾃﾞｲﾃｸﾀｰ（検知器）に光学ﾌｲﾙﾀｰを掛けて､蛍光以外の波長の光の検知を防いでいる｡､その様なｼｽﾃﾑは､使用の際､周囲光を遮蔽しないと､昼光の赤 / 赤外成分が､蛍光信号に重なってしまう｡FMS 2では､作用光を蛍光信号と識別するために、一般に変調蛍光測定と言われる､電子的方法を使っている｡測定中､試料に､周囲光を遮蔽した条件下で､ｻﾝﾌﾟﾙ から パルス 蛍光信号を起させる為に､ｱﾝﾊﾞｰ (時には ﾌﾞﾙｰ)の パルス LED光源（変調 ﾋﾞｰﾑ )を当てる(図 1-2 のA）。周囲光を当てると､光学ﾌｲﾙﾀｰを装備したFMS 2では､ﾃﾞｲﾃｸﾀｰに3つのﾀｲﾌﾟの光信号が当たる｡
＊ 蛍光と同じ波長の周囲光
＊ 周囲光で起こる パルス しない蛍光信号
＊ 変調 ﾋﾞｰﾑ で起こる パルス 蛍光信号 （図 1-2 のB)
周囲光が加わると､ｻﾝﾌﾟﾙの生理機能が変化して､蛍光として再放出されるエネルギーｰの割合が変わる｡この様に､変調 ﾋﾞｰﾑ で起こるパルス蛍光信号のﾋﾟｰｸの度合いは､ｻﾝﾌﾟﾙの生理機能の変化を反映する｡高速パルス ﾋﾟｰｸ ﾄﾗｯｷﾝｸﾞによる電子的増幅測定により､周囲光と非 パルス蛍光信号は除かれる （図1-2 のC)。
変調 ﾋﾞｰﾑにより生じるパルス蛍光により､PS IIの光化学反応が光を使用する効率を知ることができる｡測定光をあてることで､調べるｻﾝﾌﾟﾙの生理機能の変化を引き起こしてはならない｡強いパルス光をｻﾝﾌﾟﾙ に当てると､その測定に大きな人為的要素を加える恐れがある｡その様な問題を避けるためFMS 2は､極めて短いパルス光(1.8 μsec.)とパルスとパルスの間隙を長くした変調ﾋﾞｰﾑを出す様に設計されている｡実際の結果では､ｻﾝﾌﾟﾙ に当たる変調 ﾋﾞｰﾑ の積分量は非常に小さい(<0.05μmolm -2 s -1)ので､ｻﾝﾌﾟﾙ に生理機能的変化は起こさないが､蛍光分析にとって信頼出来る信号を得るに充分である｡蛍光信号の解釈は､初期のKautskyとHirsch (1931)の実験以来､光合成におけるPS IIの機能に関する情報を決定する種々の方法が進歩した結果、目覚しい発展が見られる｡その様な技法を取り込んで､FMSの ﾊｰﾄﾞ と ｿﾌﾄ は､適切な測定値を 保存して､重要な ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ を自動的に計算する｡背後にある諸原理と手順に就いては､第２章のFMS Windows ｿﾌﾄ による本機の制御で述べる｡幾つかの "non-specific" ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ 機能も入っている｡それらの目的は､実験に充分な弾力性を持たして､新しい ﾌﾟﾛﾄｺﾙ を開発する為である｡これも､第２章で述べる｡
2.0 ﾊｰﾄﾞｳｴｱ
FMS 2は下記の ｺﾝﾎﾟｰﾈﾝﾄ から成る：
＊ 制御 ﾕﾆｯﾄ：
電子系､光学系と光源を内蔵する｡ 電源は､内蔵の電池が供給する｡
＊ ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ ｲﾝﾀｰﾌｴｲｽ：
内部光学系と ｻﾝﾌﾟﾙ の接続｡
＊ ﾘｰﾌ ｸﾘｯﾌﾟ：
光学系に対して ｻﾝﾌﾟﾙ を保持する｡
PAR/Temp. ｸﾘｯﾌﾟ で､周囲条件の同時測定が出来る｡
暗順応 ｸﾘｯﾌﾟ で､複数 ｻﾝﾌﾟﾙ を迅速に光の遮蔽が出来る｡
＊ ﾏﾙﾁ 電池 ﾁｬｰｼﾞｬｰ：
4台迄の本機の電池を同時に､一昼夜で充電出来るので､放電した電池を
現場で即時に交換出来る｡
＊ 15V電源 ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ：
ﾏﾙﾁ 電池 ﾁｬｰｼﾞｬｰ やFMSの制御 ﾕﾆｯﾄ への給電｡
これらの ｺﾝﾎﾟｰﾈﾝﾄ は､使用に先立ち､正確に組み立てねばならない｡
輸送時に電池が放電している恐れがあるので､開梱したら先ず ﾏﾙﾁ ﾁｬｰｼﾞｬｰを
組み立てる｡
2.1 ﾏﾙﾁ ﾁｬｰｼﾞｬｰ
FMS 2には､電池が5個付いている。 ｼｽﾃﾑ を使用する前に､充電が必要である｡
ﾏﾙﾁ ﾁｬｰｼﾞｬｰ で､4個迄同時に充電出来る｡
ﾁｬｰｼﾞｬｰ を平らな所に置き､各電池を､黒の上面を上に､金属端子を ﾁｬｰｼﾞｬｰ の
端子に合わせて､ｽﾛｯﾄ に入れる｡ （図 1-3)
電池端子と ﾁｬｰｼﾞｬｰ 端子は､正しく挿入しないと接触しない様設計されており､
逆に接続される恐れはない｡
注： ﾁｬｰｼﾞｬｰ は4個迄の電池を同時充電出来る｡ 電池の数に関係無く､充電出来る｡ ｽﾛｯﾄ は独立した充電 ﾁｬﾝﾈﾙ であり､操作中に別の端子に触れても危険は無い｡
電源は､15V ﾒｲﾝ ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ から供給される｡ 5
3 ﾋﾟﾝ DIN ﾌﾟﾗｸﾞ を ﾁｬｰｼﾞｬｰ の側面の ｿｹｯﾄ に繋ぐ｡
電源 ｺｰﾄﾞ で ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ と ﾒｲﾝ を繋ぐ｡
通電後数秒で､LED ｲﾝﾃﾞｲｹｰﾀｰ が電池の状態を知らせる：
赤： 放電した電池に､最大定格率で電流が流れている｡
ｸﾞﾘｰﾝ： その電池は､最低で98%充電されている｡ 50mAの微少電流で､使用迄電池をその状態に保つ｡
注： 古い､傷んだ電池の場合は､LEDは ｸﾞﾘｰﾝ のままである｡
完全に放電した電池の充電には､約8時間必要であり､一夜の充電を薦める｡
2.2 制御 ﾕﾆｯﾄ への電池の着脱 6
携帯 ｹｰｽ の底に電池を１個入れたら､２番目の電池を次の様にして､FMS 2の制御
ﾕﾆｯﾄ に挿入する：
1. 電池を､電池挿入口に対して45°に保持し､黒い電池上部を左側に向ける｡
2. 挿入口の ｷｬｯﾁ を上げる｡
3. 電池を ｽﾛｯﾄ に挿入する｡ ｺﾝﾊﾟｰﾄﾒﾝﾄ 内の ｽﾌﾟﾘﾝｸﾞ 式端子が､自動的に電池端子と噛み合う。 挿入口の ｷｬｯﾁ が電池を支える｡
注： 電池を逆に差し込んでも､支障は無いが､本機は動作しない｡
使用時の電池の放電の速さは､基本的には､ﾊﾛｹﾞﾝ ﾗﾝﾌﾟ の使用頻度で決まる｡
パルス の使用頻度が高い時や､作用光を長い時間使用すると､電池は早く消耗する｡
実験の計画を立てる時は､次の表を参考にして､充電の時期を決める。
85 unit 0.7 sec の連続最大 パルス 数 ≒ 800 パルス
50 unit 作用光の最大照射時間 ≒ 60 分
FMS 2の電子系は､使用中一定の光強度を維持する様に設計されている｡
電池の容量が､しきい値に達すると､警告 ﾒｯｾｰｼﾞ が出る｡
その場合､単独使用も､ｺﾝﾋﾟｭｰﾀｰ 接続使用も不可能となるので､直ちに電池を交換する｡
野外で電池を交換する時は､本機の通電を切り､電池 ｺﾝﾊﾟｰﾄﾒﾝﾄ の 7
ｷｬｯﾁ を上げ､電池を取り出し､交換する｡
本機の ﾒﾓﾘｰ は､内蔵の ｷｬﾊﾟｼﾀｰ で保護されているおで､数日間電池無しでも､ﾃﾞｰﾀ は
消えない｡
注： 日々の作業終了後､PCに ﾃﾞｰﾀ を ｱｯﾌﾟﾛｰﾄﾞ するのが賢明である｡ そうすれば､ﾊﾞｯｸｱｯﾌﾟ 用の ﾃﾞｰﾀ ｺﾋﾟｰ が作れる｡
2.3 FMS 2制御 ﾕﾆｯﾄ への接続 完全充電した電池を入れたら､制御 ﾕﾆｯﾄ を携帯 ﾊﾞｯｸﾞ に納める｡ 使用前に幾つかの電気的､光学的接続が必要である。
2.3.1 電気的接続 制御 ﾕﾆｯﾄ の右側の ﾎﾟｰﾄ に行う｡ PC無しの野外使用では､これらの 接続無しでも､動作する｡
Serial I/O socket (D) ｺﾝﾋﾟｭｰﾀｰ 制御操作､又は ﾃﾞｰﾀ ｱｯﾌﾟﾛｰﾄﾞ の際､ｼﾘｱﾙ ｹｰﾌﾞﾙ で PC COMM ﾎﾟｰﾄ に繋ぐ｡ PC無しの現場使用では不要｡
DC Inputs socket (E) 次の外部DC電源の接続に使う： ｵﾌﾟｼｮﾝ の電池 ｹｰﾌﾞﾙ での､12V外部電池 ｵﾌﾟｼｮﾝ の ﾒｲﾝ ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ からの12V出力 ﾏﾙﾁ ﾁｬｰｼﾞｬｰ 無しの､装着電池の再充電用15V ﾒｲﾝ ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ
User Interface socket (C) ｵﾌﾟｼｮﾝ の外部装置制御用の､4つの ﾃﾞｼﾞﾀﾙ と､1つのD/A 制御 ﾗｲﾝ への ｱｸｾｽ 8
2.3.2 光学系の接続 制御 ﾕﾆｯﾄ 内の光源と ﾃﾞｲﾃｸﾀｰ を､調べる ｻﾝﾌﾟﾙ と ﾘﾝｸ させる｡ ﾘﾝｸ は､ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ ﾌﾟﾛｰﾌﾞ から光学 ｲﾝﾀｰﾌｴｲｽ ﾓｼﾞｭｰﾙ を介して為される｡ ﾌﾟﾛｰﾌﾞ を正しく装着すると､ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ 内の光 ｶﾞｲﾄﾞ が､自動的に制御 ﾕﾆｯﾄ 内の光源又は ﾃﾞｲﾃｸﾀｰ に ｱﾗｲﾒﾝﾄ される｡
注： ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ ｹｰﾌﾞﾙ は頑丈に作られているが､その芯は､数千本の ｸﾞﾗｽﾌｱｲﾊﾞｰ で作られている為､曲げに弱い｡ 損傷すると､FMSの機能が大幅に低下する｡ 強い信号を取るため､ｹｰﾌﾞﾙ の先端を､出来るだけ ｻﾝﾌﾟﾙ に近づける｡ 通常､ｻﾝﾌﾟﾙ から1｡5cm以内にし､ﾌｱｲﾊﾞｰ の影が ｻﾝﾌﾟﾙ に掛らない様にする｡ この目的に､一対の ﾘｰﾌ ｸﾘｯﾌﾟ が用意されている｡
2.4 FMS ﾘｰﾌｸﾘｯﾌﾟ
2.4.1 PAR/温度 ﾘｰﾌｸﾘｯﾌﾟこの ﾘｰﾌｸﾘｯﾌﾟ は､周囲光条件下の測定用に設計されている｡その ｽﾌﾟﾘﾝｸﾞ 式の上部で､ｻﾝﾌﾟﾙ を柔らかく挟む｡ (図1-7AのC) ｻﾝﾌﾟﾙ に60°の傾きを持つ 溝付き ﾈｯｸ に､ﾌｱｲﾊﾞｰｵﾌﾟﾃｲｯｸ を付ける｡ （Ｆ）ﾈｯｸ の度目盛りで､ﾌｱｲﾊﾞｰｵﾌﾟﾃｲｯｸ の位置を記録して､ネジで止める｡ﾌｱｲﾊﾞｰ を ｸﾘｯﾌﾟ に沿はし､ｸﾘｯﾌﾟ の端に掛ける｡制御 ﾕﾆｯﾄ の前面 ﾊﾟﾈﾙ の ｿｹｯﾄ に接続すると､"Local" ﾓｰﾄﾞ で､測定の ﾘﾓｰﾄﾄﾘｶﾞｰ ｽｲｯﾁ (F) が使え､また内蔵の熱伝対と光 ｾﾝｻｰ に繋がる｡(C)複数の ｻﾝﾌﾟﾙ を扱う時は､ﾘｰﾌｸﾘｯﾌﾟ を手で持つか､三脚に付ける｡
PAR ｾﾝｻｰ は､蛍光分析中の周囲光強度の記録と､本機 ｾｯﾄｱｯﾌﾟ 中の 10 FMSの作用光線と飽和光源の測定用に設計されている｡ ﾘｰﾌｸﾘｯﾌﾟ の2つの位置の､何れかに装着出来る。 Upper side mount: 幅の広い ｻﾝﾌﾟﾙ に依る影を避ける｡ 分析中の周囲光測定に適する。(図 1-7A) Lower front mount: ｾﾝｻｰ に影を与えない細い葉の分析中の周囲光測定に適する。 上部を前に ｽﾗｲﾄﾞ した時は､ﾌｱｲﾊﾞｰｵﾌﾟﾃｲｯｸ の光出力の校正の際､ｻﾝﾌﾟﾙ と ｾﾝｻｰ の ﾚﾍﾞﾙ との ｱﾗｲﾒﾝﾄ を取る｡
実験を始める前に､飽和光 ﾗﾝﾌﾟ と､使用する作用光の設定強度の出力を測ることが 役に立つ｡ それには､蛍光分析中､ｻﾝﾌﾟﾙ と ﾌｱｲﾊﾞｰ が､同じｼﾞｵﾒﾄﾘｰ と距離に来る様､ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ とPAR ｾﾝｻｰ を位置合わせしなければならない｡ その為､ｸﾘｯﾌﾟ の上部を下げ､一杯前に押して､PAR ｾﾝｻｰ が ﾌｱｲﾊﾞｰ の視野に入る 様にする｡ 次に､付属している光源を順次点灯して､ 標示の読みを記録する｡ 光校正が終わったら､ｸﾘｯﾌﾟ 上部を戻して､ﾌｱｲﾊﾞｰ を測定位置に戻す｡ ｻﾝﾌﾟﾙ の温度も､PARと蛍光と同時に ﾓﾆﾀｰ される｡ 熱伝対は､ｻﾝﾌﾟﾙ の裏面に接触する様､ｸﾘｯﾌﾟ の下部部分より､若干高い｡ 従って ｻﾝﾌﾟﾙ 脱着の際､引っかけない様注意する｡
2.4.2 暗順応 ﾘｰﾌｸﾘｯﾌﾟ と ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ ｻﾝﾌﾟﾙ を周囲光から遮蔽しなければならない状況に対応するため､別の ﾘｰﾌｸﾘｯﾌﾟ ｼｽﾃﾑ がある｡ Fv/Fmの測定や､基準の作用光で組織を馴染ませるため等､暗順応の必要な実験に 適する｡ 先ず､ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ の ｻﾝﾌﾟﾙ 側に､ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ （図 1-8)を付ける｡
ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ (A)を ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ の ｶﾗｰ (B)に差込み､側面の ﾈｼﾞ (C) を締める。 その ｱｯｼｨｰ を､暗順応 ｸﾘｯﾌﾟ (D)ﾆ付け､ｶﾗｰ の ﾈｼﾞ を緩めて､ｵﾌﾟﾃｲｯｸ を希望の 位置に合わせて､固定する｡ 注： ｻﾝﾌﾟﾙ が均一に照射され､強い蛍光信号を取るには､ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ の ｼﾞｵﾒﾄﾘｰ が重要である｡ 実際には､何回か測定して､最適の位置を探す｡ ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾁｯｸ を固定したら､暗順応 ｸﾘｯﾌﾟ を外して､実験 ｻﾝﾌﾟﾙ に止める｡ ｼｬｯﾀｰ ﾌﾟﾚｰﾄ (F)を前に押すと､組織は暗順応される｡ 適当な時間の経過後､組織は暗順応され､測定が可能になる｡ ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ / ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ ｱｯｼｨｰ を暗順応 ｸﾘｯﾌﾟ 上に密着させて､ｼｬｯﾀｰを開くと 組織はFMSに曝される｡ ｱﾀﾞﾌﾟﾀｰ に依って､測定中 ｻﾝﾌﾟﾙ は､完全に周囲光から遮蔽される｡ 注： 数多くの測定をこなすには､幾つもの ｻﾝﾌﾟﾙ を ｸﾘｯﾌﾟ で同時に暗順応させる方が効果的である｡ ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ を ｸﾘｯﾌﾟから ｸﾘｯﾌﾟに付け替えるだけで､測定を繰り返せる｡
補足 Ａ
ﾊｰﾄﾞｳｴｱ の保守
ﾊｰﾄﾞｳｴｱ は､最小限度の摩耗部品を使って設計されている｡
一番気を付けねばならぬ部品は､ﾊﾛｹﾞﾝ ﾗﾝﾌﾟ と電池である｡
以下､それらの交換方法を述べる｡
ﾊﾞﾙﾌﾞ の交換
この ﾗﾝﾌﾟ はOSRAM 64255 8V, 25Wである｡
1. 本機の電源を切り､ﾗﾝﾌﾟ が冷却する迄数分間待つ｡
2. 本機を立てて､電池 ｺﾝﾊﾟｰﾄﾒﾝﾄ を手前にする｡
ｺﾝﾊﾟｰﾄﾒﾝﾄ の ｻｲﾄﾞ ﾊﾟﾈﾙ を止めている､
4つの ﾈｼﾞ と ﾜｯｼｬｰ を外す｡
3. ﾄﾞﾗｲﾊﾞｰ の先で､ﾗﾝﾌﾟ ﾍﾞｰｽ (A)の接続を外す｡
4. ﾕﾆｯﾄ の前面近くに ﾊﾞﾙﾌﾞ がｱﾙ｡ (B)
5. ﾜｲﾔｰ ﾊﾞﾙﾌﾞ ﾘﾃｲﾅｰ の ｸﾘｯﾌﾟ (D)を外す｡
6. ﾗﾝﾌﾟ 支持柱(C)を緩める.
7. ﾊﾞﾙﾌﾞ を外す｡
8. 注意して､新しい ﾊﾞﾙﾌﾞ を入れる｡
ﾗﾝﾌﾟ に指脂の付かぬ様､ｺﾞﾑ 手袋の着用が望ましい｡
ﾗﾝﾌﾟ を支え乍ら､支持柱を着けて､締める｡
9. ﾗﾝﾌﾟ 位置を調節してから､ﾜｲﾔｰ ﾘﾃｲﾅｰ と共に固定する｡
10. ﾗﾝﾌﾟ ﾍﾞｰｽ に､極性を確かめて ｺﾈｸﾀｰ を押し込む｡
補足 B
外部 ﾕｰｻﾞｰ ｲﾝﾀｰﾌｴｲｽ
FMS2の測定は､FMSの ﾕｰｻﾞｰ ｲﾝﾀｰﾌｴｲｽ ｿｹｯﾄ に繋がっている､4つの ﾃﾞｼﾞﾀﾙ 制御
ﾗｲﾝ の1つを介して､外部の装置から ﾄﾘｶﾞｰ 出来る｡
ﾃﾞｼﾞﾀﾙ IN ｺﾈｸｼｮﾝ は下記の通り：Channel Number: Pin Connection: 0 4 1 5 2 6 3 7 Ground 3 and 11
FMS 2 は亦､ﾃﾞｼﾞﾀﾙ OUT ｺﾈｸｼｮﾝ を使って､測定を ﾄﾘｶﾞｰ 出来る｡Channel Number: Pin Connection: 0 12 1 13 2 14 3 15 Ground 3 and 11
ｱﾅﾛｸﾞ 出力 ﾁｬﾝﾈﾙ の接続は： ｱﾅﾛｸﾞ 出力 10 ｱﾅﾛｸﾞ Ground 2
第2章
ｿﾌﾄｳｴｱ のインストール､ｼｽﾃﾑ の操作､及び ﾃﾞｰﾀ の処理
1.0 FMS ｿﾌﾄｳｴｱ 1
FMSには､2つのWindows ｿﾌﾄ が付いている｡ "Modfluor" 本機の制御と､ﾄﾚｰｽ ﾃﾞｰﾀ 標示 ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ "Parview" ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ﾃﾞｰﾀ の ｱｯﾌﾟﾛｰﾄﾞ と ﾋﾞｭｰｱｰ ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ
全ての ｿﾌﾄ と ﾍﾙﾌﾟ ﾄﾞｷｭﾒﾝﾄ は､2枚の3_" ﾌﾛｯﾋﾟｰ ﾃﾞｲｽｸ に入っている｡
ﾌｱｲﾙ を適当な ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ 自動的に ｺﾋﾟｰ して､"Hansatech" ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ ｸﾞﾙｰﾌﾟ を創る為の
簡単なインストーラー も入っている｡
1.1 FMS ｿﾌﾄ の装着 このインストーラー はMicrosoft Windowsで動作する｡ 従って､Win 3.x ｼｽﾃﾑ へインストールは､次の手順に由る： 1. Windowsを ﾛｰﾄﾞ する｡ 2. disk #1を､3_ ﾌﾛｯﾋﾟｨｰ ﾃﾞｲｽｸ ﾄﾞﾗｲﾌﾞ に入れる｡ 3. Program Managerで､Files menuを選ぶ｡ 4. Run ｵﾌﾟｼｮﾝ を選ぶ｡ 5. ｺﾏﾝﾄﾞ ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ ﾎﾞｯｸｽ に､a:＼setup.exe.と ﾀｲﾌﾟ する｡ Win95 ﾕｰｻﾞｰ の場合は､若干手順が異なる｡ 1. Win95を ﾛｰﾄﾞ する｡ 2. disk #1を､3_" ﾌﾛｯﾋﾟｰ ﾃﾞｲｽｸ ﾄﾞﾗｲﾌﾞ に入れる｡ 3. Start ﾎﾞﾀﾝ を ｸﾘｯｸ する｡ 4. Run ｵﾌﾟｼｮﾝ を選ぶ｡ 5. ｺﾏﾝﾄﾞ ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ ﾎﾞｯｸｽ にa:＼setup.exeと ﾀｲﾌﾟ する｡ 上の手順で､インストール 画面 が出て､インストールｵﾌﾟｼｮﾝ ﾀﾞｲｱﾛｰｸﾞ ﾎﾞｯｸｽ が開く｡ この ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ は､初期値インストール ｵﾌﾟｼｮﾝ を示す｡ その光源 ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ はA:＼ で､その 初期値 転送先はC:＼FMSに ｾｯﾄ される｡ 転送先の変更も可能である｡ 詳しい説明は､Help ﾎﾞﾀﾝ でon-line help ﾌｱｲﾙ に ｱｸｾｽ する｡ 操作の開始は､Start installation ﾎﾞﾀﾝ を押す｡ "Modfluor"と"Parview"の ｱﾌﾟﾘｹｰｼｮﾝ が､適当な ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ (C:＼FMS 初期値)に ｲﾝｽﾄｰﾙ され､一方 "Data"と"Script" ｻﾌﾞﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ が､3 ｾｯﾄ の ｽｸﾘﾌﾟﾄ 例と､ それから記録される ﾃﾞｰﾀ を入れるために､作られる｡ FMS ｿﾌﾄ はまた､その ﾒﾆｭｰ 構造に､Hansbd tru-type ﾌｵﾝﾄ を使うので､そのインストールﾙｰﾁﾝ は自動的に､これを適当なWindows ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ に ｲﾝｽﾄｰﾙ する｡ 装着の途中で､この ﾙｰﾁﾝ はDisk #2を ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ する｡このインストールで､"Hansatech"と呼ぶ ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ ｸﾞﾙｰﾌﾟ が自動的に ｾｯﾄ される｡ 2その中には､"Modfluor"と"Parview" ｱﾌﾟﾘｹｰｼｮﾝ 及び､"Uninstall" ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ 実行のｱｲｺﾝ が入っている｡"Uninstall"で､装着されている ｿﾌﾄ､ﾌｵﾝﾄ 及び例題ﾌｱｲﾙ を除く為､インストール中に倉作られる "Log" ﾌｱｲﾙ に ｱｸｾｽ する｡
1.2 "Modfluor"と"Parview"の実行両方の ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ 共､FMSに繋がずに実行出来る｡ 然し大抵の場合それらは､制御ﾕﾆｯﾄ と交信する為に使う｡RS232 ｼﾘｱﾙ ｹｰﾌﾞﾙ で､PCのCOMM1又はCOMM2 ｼﾘｱﾙ ﾎﾟｰﾄ と､FMSの ｼﾘｱﾙ I/O ﾎﾟｰﾄ”を繋ぎ､制御 ﾕﾆｯﾄ をONし､"PC" ﾎﾞﾀﾝ を押して､"PC-mode"を選ぶ｡Win 3.x ﾕｰｻﾞｰ は､"Hansatech" ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ ｸﾞﾙｰﾌﾟ に切り換えて､適当な ｱｲｺﾝ をｸﾘｯｸ すれば､何れの ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ でも実行出来る｡ｽﾌﾄ が交信出来無い時は､ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ ﾎﾞｯｸｽ が開き､"demonstration mode"を使うか､ﾘｾｯﾄ を要求する｡ 大抵の不具合は､制御 ﾕﾆｯﾄ がONされていないか､"PC-mode" に ｾｯﾄ されていない時である｡然し､COMM2を使用の時は､ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ の ｺﾏﾝﾄﾞ ﾗｲﾝ を変える必要がある｡それには､ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ を閉じ､適当な ｱｲｺﾝ を､ﾏｳｽ で 1回 ｸﾘｯｸ して､ﾊｲﾗｲﾄ し､"Program Manager" ﾒﾆｭｰ の､File, Properties を選ぶ｡その ｺﾏﾝﾄﾞ ﾗｲﾝ は､C:＼FMS＼MODFL2.EXEから C:＼FMS＼MODFL2.EXE／2への切り換えが要する｡これで ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ は､ﾘｽﾀｰﾄ 出来る｡Win95 ﾕｰｻﾞｰ は､Sstart ﾎﾞﾀﾝ を ｸﾘｯｸ し､ProgramsとHansatech gorupを選べば､この ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ に ｱｸｾｽ 出来る｡ｿﾌﾄ 交信の ﾃｽﾄ は同じで､COMM2使用の時は､その ｺﾏﾝﾄﾞ ﾗｲﾝ も調節する｡
その手順は：
1. Start ﾎﾞﾀﾝ を ｸﾘｯｸ する｡
2. Settingsを選ぶ｡
3. Taskbarを選ぶ｡
5. "Customize Start Menu" ｵﾌﾟｼｮﾝ で､Adavnced ﾎﾞﾀﾝ を ｸﾘｯｸ する｡
7. Modfl2 ｱｲｺﾝ を､右の ﾏｳｽ ﾎﾞﾀﾝ で ｸﾘｯｸ して､propertiesを選ぶ｡
8. ｺﾏﾝﾄﾞ ﾗｲﾝ を変える｡
9. Parview ｱｲｺﾝ を選んで､ﾌﾟﾛｾｽ を繰り返す｡
10. ｺﾏﾝﾄﾞ ﾗｲﾝ を変える｡
1.3 Troubleshooting Communications Problems 3PCとFMSの 初期値 交信は､38,400 ﾎﾞｰﾚｰﾄ でCOMM1に ｾｯﾄ される｡一部の古い ﾎﾟｰﾄ ﾁｯﾌﾟ の ｾｯﾄ では､この ﾃﾞｰﾀ 転送 ｽﾋﾟｰﾄﾞ について行けないので､交信の不具合や､ﾌｱｲﾙ ｱｯﾌﾟﾛｰﾄﾞ 不調の問題が起こる｡
次の手順で ﾄﾗﾌﾞﾙｼｭｰﾄ する：
4. 一旦 ﾎﾞｰﾚｰﾄ が選ばれると､制御 ﾕﾆｯﾄ がそれを ﾒﾓﾘｰ に保持して､本機がON される毎に､この ﾚｰﾄ が使われる｡
5. ﾎﾞｰｾｯﾃｲﾝｸﾞ を変更した時は､"Modfluor"と"Parview" ｿﾌﾄ を ﾘﾌﾞｰﾄ する｡ 両方の ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ が自動的に検索されて､初期化の間に正しい ボーｾｯﾃｲﾝｳ に切り換えられる｡
遅い交信速度を使っても､そのFMSの ﾃﾞｰﾀ 読み取り機能に支障は出ないが､沢山の ﾌｱｲﾙ を本機のﾒﾓﾘｰ から ｱｯﾌﾟﾛｰﾄﾞ するのに時間が掛かる｡
FMSには､2つの操作 ﾓｰﾄﾞ がある｡
＊ PC mode 制御 ﾕﾆｯﾄ が､'Modifluor'からの ｺﾏﾝﾄﾞ でPCと ﾘﾝｸ され､PCの ｷｰ
ﾎﾞｰﾄﾞ から 'real-time' で制御される｡
＊ Local mode 予め ﾛｰﾄﾞ された ｽｸﾘﾌﾟﾄ に､制御 ﾕﾆｯﾄ の表示 ﾊﾟﾈﾙ 上の4つの (第3章) ﾎﾞﾀﾝ で ｱｸｾｽ して､測定 ｺﾏﾝﾄﾞ を自主適に実行する｡
本機を始めて使う時は､Fv/FmとφPSII の2つの 初期値 ｽｸﾘﾌﾟﾄ だけ入っている｡
それ故､ｼｽﾃﾑ を ﾃｽﾄ して､個々の ｱﾌﾟﾘｹｰｼｮﾝ により適した ｽｸﾘﾌﾟﾄ を創るには､
PC mode が便利である｡
2.1 Modfluorに依るPC mode操作 Modfluor ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ が制御 ﾕﾆｯﾄ に入ると､ﾃﾞｰﾀ 記録 画面 が ﾛｰﾄﾞ される｡
2.2 記録 画面 ｿﾌﾄ が始めて初期化された時に 創られる 初期値 記録 画面 は 4つのareaから成る。 ＊ ﾃﾞｰﾀ 記録area (A) ＊ 本機 ﾓﾆﾀｰ ﾊﾞｰ (B) ＊ ﾄﾞﾛｯﾌﾟ ﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ ﾊﾞｰ (C) ＊ ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ (D) (A)は ｸﾞﾗﾌｲｯｸ 表示部で､A/D ｺﾝﾊﾞｰﾀｰ で ﾋﾞｯﾄ 変換された､蛍光 ﾃﾞｰﾀ（Y軸)が 時間(X軸)に対して ﾌﾟﾛｯﾄ され､ﾘｱﾙﾀｲﾑ の ﾁｬｰﾄ ﾚｺｰﾀﾞｰ の働きをする｡ 両軸共に､自動的に全 ﾃﾞｰﾀ を表示する様に､或いは ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ のGraph 機能 (2.4.3)で希望の個所を､手動で ｽﾞｰﾑ する事も出来る｡ A/D変換の最大 ﾚﾝｼﾞ は4095 ﾋﾞｯﾄ で､それ以上の値の部分は ｸﾞﾚｰｱｳﾄ される｡ この ﾌﾟﾛｯﾄ の自動目盛りの働きで､ﾃﾞｰﾀ 読み取りが､最大で約50分続けられる｡ ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ のPAUSE ﾎﾞﾀﾝ を使って､ﾁｬｰﾄﾚｺｰﾀﾞｰ の ﾍﾟﾝ ｵﾌ と同じ様な動作で､ ﾃﾞｰﾀ の読み取りを中断出来る｡ この機能を使って､ﾃﾞｰﾀ の記録を希望の期間に限れば､更に長い ﾌﾟﾛﾄｺｰﾙ も実行 出来る｡ 測定中､ﾃﾞｰﾀ は､本機 ﾓﾆﾀﾘﾝｸﾞ ﾊﾞｰ (B)上に ﾃﾞｼﾞﾀﾙ 表示される｡ 蛍光の情報は､PAUSE機能で ﾃﾞｰﾀ の記録が中断した時も常に更新されるので､ 測定再開前に､蛍光の定常状態の予測が出来る｡ PAR､温度 ﾘｰﾌｸﾘｯﾌﾟ も又､ﾃﾞｼﾞﾀﾙ 制御 ﾗｲﾝ の状態に関する情報と共に､ﾓﾆﾀﾘﾝｸﾞ ﾊﾞｰ に示される｡ 外部装置を使用しない場合は､ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰﾊﾞｰ のView 機能を ﾄｸﾞﾙ して､ ﾓﾆﾀﾘﾝｸﾞ ﾊﾞｰ を消せる｡ (2.4.2) ｿﾌﾄ の構成､ﾌｱｲﾙ の扱いと､本機の ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾐﾝｸﾞ 機能は､ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ 上に 機能別に ｸﾞﾙｰﾌﾟ に纏められている｡ ﾏｳｽ 又は ｱｸｾﾚﾚｰﾀｰ ｷｰ で ｱｸｾｽ する｡
Graph機能は､ALTとG を同時に押す｡ 或 ｸﾞﾙｰﾌﾟ を選ぶと､関連する機能の ｻﾌﾞ ﾒﾆｭｰ が開く｡ 希望する機能は､ｱｸｾﾚﾚｰﾀｰ ｷｰ (Key)で､又は↑↓ ｷｰ で ﾊｲﾗｲﾄ してReturnを押す｡ 別の ｻﾌﾞ ﾒﾆｭｰ には､→← ｷｰ 又は ﾏｳｽ で ｱｸｾｽ する｡ 各 ﾒﾆｭｰ 機能の詳細は､2.4 で述べる｡ FMS光源と､測定動作の制御は､ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ (図2-1のD)で行う｡ 光源は､適当な ﾄｸﾞﾙ ﾎﾞﾀﾝ を ﾏｳｽ の左 ﾎﾞﾀﾝ を ｸﾘｯｸ して起動させる｡ 変調 ﾋﾞｰﾑ､作用光と遠赤外 光源は点灯したままである｡ （凹んだ ﾎﾞﾀﾝ で 示される。 夫々の ﾎﾞﾀﾝ を再度押すと消える｡ 作用光の照射時間は､"Actinic" ﾎﾞﾀﾝ の隣のedit boxに､数値 (0 - 50)を入れて 決める｡ (2.6.2.2) 注： 作用光の出力 ﾚﾍﾞﾙ の変更は､その光源を初期化した時のみ出来る｡ 一旦 ﾄｸﾞﾙ ｵﾌ してから､再度 ｵﾝ すると､変えられる｡(2.6.2.2) 6 飽和 パルス は､"Pulse" ﾎﾞﾀﾝ を押して出す｡ パルス 照射中は､ﾎﾞﾀﾝ は凹んだままで､終わると自動的に戻る｡ パルス 強度(0 - 100)と長さ(0.3 - 5.0 sec.)は､edit boxの ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ で行う｡(2.6.2.3.) 測定機能は､そのFMSが記録している間だけ使える｡ "Record" ﾎﾞﾀﾝ を押すと､新しい測定が始まる｡ 同時に､蛍光検知に必要な変調 ﾋﾞｰﾑ が自動的に ﾄﾘｶﾞｰ され､本機の ｾｯﾃｲﾝｸﾞ 等､ 測定中一定に保たなければならない ﾒﾆｭｰ 機構は ﾃﾞｲｽｴｰﾌﾞﾙ される｡ 一般的な蛍光 ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ は､ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ にある種々の ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ﾎﾞﾀﾝ で取れる｡ 各測定機能の詳細は 2.6.3 で述べる｡ 各 ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ の ﾃﾞｼﾞﾀﾙ 値は､ｿﾌﾄ 内の"Parameter Window"に書かれる｡ 初期設定では､画面の ｽﾍﾟ-ｽを節約する為､"Parameter Window"は出ない｡ 然し､個々の要請に合わせて､ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ の View機能で､ｶｽﾀﾏｲｽﾞ 出来る｡ (2.4.2) 記録期間中､個々の照射事象は､↑がon､↓がoffの､ﾏｰｸ が付く｡ 除草剤処理等 ﾕｰｻﾞｰ の事象も､ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ の ﾎﾞﾀﾝ で､ﾏｰｸ が付けられる｡ (2.6.4) 出力される柱状 ﾃﾞｰﾀ は､色分けされるので､識別が簡単である｡ (2.4.4.2) 次に ｽﾍﾟﾔｰ ｻﾝﾌﾟﾙ で ﾃｽﾄ して､最適の機能を発揮する様､構成する｡
2.3 FMSの ﾃｽﾄ 実験の前に､本機の幾つかの機能面を ﾁｪｯｸ する：
＊ 信号は充分強いか？
＊ 変調 ﾋﾞｰﾑ で ｻﾝﾌﾟﾙ の生理機能が変わらないか？
＊ 飽和 パルス は ｻﾝﾌﾟﾙ を飽和させられる程強いか？
＊ 最大の蛍光が､本機の ﾚﾝｼﾞ 内に入るか？ 上記の4点を ｽﾍﾟﾔｰ ｻﾝﾌﾟﾙ で検証する為の､2つの実験を簡単に説明する：
1. 暗順応 ｸﾘｯﾌﾟ を使うか､PAR/温度 ｸﾘｯﾌﾟ に ｶﾊﾞｰ を掛けて､ｻﾝﾌﾟﾙ を暗順応する｡
2. ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ の"Record" ﾎﾞﾀﾝ を押して､新しい測定を行う｡ 暗順応された蛍光が ﾌﾟﾛｯﾄ される｡ これは､ｻﾝﾌﾟﾙ からの最低蛍光信号で､測定が正しければ､10 - 700 bitsの ﾚﾝｼﾞ に 入る筈である｡ 信号が小さ過ぎる時は､ﾃｽﾄ を中止("Record" ﾎﾞﾀﾝ を再度押す)して､ｹﾞｲﾝ を調整 して本機の感度を上げる(2.4.1.5)か､ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ を ｻﾝﾌﾟﾙ に近づける｡ 7 信号が強すぎる(>700 bits)と､飽和 パルス 使用の時､本機が ｵｰﾊﾞｰｽｹｰﾙ する｡ 本機の ｹﾞｲﾝ を落とすか､ﾌｱｲﾊﾞｰ ｵﾌﾟﾃｲｯｸ を ｻﾝﾌﾟﾙ から離す｡ 又､実験中記録した信号が一定である事の ﾁｴｯｸ も重要である｡ 下図の例では､暗順応された蛍光信号は500bits（以後の測定に適する）程度で あるが､時間と共に徐々に増える｡ この事は､その変調 ﾋﾞｰﾑ の ｾｯﾃｲﾝｸﾞ が高過ぎ､ｻﾝﾌﾟﾙ に生理作用的影響のあることを示す｡ 最も一般的な現象は､”変数”蛍光と言われる栄光信号の緩やかな上昇で､変調ﾋﾞｰﾑ がかなりの量の光化学作用を起こす｡(2.6.3.1.1.)
この現象の為に､一般的に使われる蛍光 ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ の推定に誤差が生じる。 (2.6.3.1.1.) 変調 ﾋﾞｰﾑ の ｾｯﾃｲﾝｸﾞ を下げて､その周波数を減らすとか､ｻﾝﾌﾟﾙ と 光ファイバーと試料の距離を遠くして変調強度を落とすという補正作業が必要になる｡
飽和ﾗﾝﾌﾟ を使う時､その最大蛍光 ﾚﾍﾞﾙ が記録出来る様に､本機が構成 されているかの ﾁｴｯｸ も大切である｡ 次の短い実験で確かめられる：
2. "Record" ﾎﾞﾀﾝ を押して､記録する｡
4. 最後の パルス の記録が終わると､(ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ のGraph機能で)その ﾄﾚｰｽ が 自動的にスケールを合わせて表示される｡
健康な葉の一般的な ﾃｽﾄ ﾄﾚｰｽ を次に示す（図 2-3）｡
図 2-3
健全な葉の蛍光トレース 最初、試料に変調光をあて順応させた後、PSIIが光飽和するまで光強度を上げ適正な設定を行う。
その ｻﾝﾌﾟﾙ からの最大蛍光収率は､飽和 パルス 光を与えると出る｡(2.6.3.1.2) この実験では､飽和光の強さを増やしながら､数個の パルス を与えた｡ 6つの蛍光 ﾋﾟｰｸ は､50, 60, 70, 80, 90, 100 unitsに対応する パルス を示す｡ 80 units迄の パルス 蛍光信号が緩やかに上昇している事は､80 units以下の パルス 強度では､PSIIを飽和させるに充分で無い事を示す｡ それ故､FmとφPHII の正確な測定には､その パルス 強度を80 units以上に ｾｯﾄ しなければならない｡
もう一つの パルス 光の大事な機能は､その最大蛍光信号が､本機の検知範囲に入っていることをチェックすることである｡ 本機のA/D変換は､0 - 4095 bits ﾚﾝｼﾞ で働く｡ 0以下､或いは4095以上の信号は､ 画面の記録部分の上又は下部で､直線となる｡ FMSの電子制御系は､負の信号を避ける様に 設計されているが､光ファイバー が ｻﾝﾌﾟﾙ に 近過ぎると､検知された信号が4095 bits 以上に なって､記録部の ｸﾞﾚｰ ｿﾞｰﾝ に入る恐れがある｡ 図２_４にその例を示す｡
その ﾋﾟｰｸ 蛍光信号は､記録から ｶｯﾄ されている｡ これは本機の ｹﾞｲﾝ を落とすか､ｻﾝﾌﾟﾙ から 光ファイバー を離せば､修正出来る｡ さもないと､そのFmとφPHII の測定に誤差が出る｡
上述の如く､FMSの構成と､ﾃﾞｰﾀ 処理機能は､ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ (図2-1のC)で ｱｸｾｽ し､測定の実行と､本機光源のｵﾝﾗｲﾝ 制御は､ﾂｰﾙﾊﾞｰ (図2-1のD)で行う｡ 次の章で､ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰの構成と処理機能を説明する｡ ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ の各項目の説明は､2.6 で述べる｡
ドロップﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ の機能
ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ は､下記の見出しの 7ｸﾞﾙｰﾌﾟ の関連した機能に分かれる：
＊ ﾊｰﾄﾞ と ｿﾌﾄ の構成 (Hardware, Graph, Tools, View)
＊ ﾃﾞｰﾀ 処理と ｴｸｽﾎﾟｰﾄ (Files)
＊ ﾕｰｻﾞｰ の決めた ｽｸﾘﾌﾟﾄ に (Script)
依る､本機のﾌﾟﾛｸﾞﾗﾐﾝｸﾞ
2.4.1 ﾊｰﾄﾞ と ｿﾌﾄ の構成
2.4.1.1. Hardware
この ﾒﾆｭｰ を選ぶと､下記の ｻﾌﾞ ﾒﾆｭｰ が出る｡
2.4.1.2 Instrument Status
FMSを ﾘﾓｰﾄ 操作する前に､どの様な ｽｸﾘﾌﾟﾄ が ﾒﾓﾘｰ に入っているか､ﾃﾞｰﾀ の 保存に使える ﾒﾓﾘｰ 量や電池容量は充分かを知っておくと便利である｡Statusコマンドは本機の状態を表示する。 Statusの表示を見て､別の ｺﾏﾝﾄﾞ を使って､新しい ﾃﾞｰﾀ 用に ﾒﾓﾘｰ を ｸﾘﾔｰ する 等の作業が出来る｡
2.4.1.3 Clear memory
一連の新しい実験を行う前に､新しい ﾃﾞｰﾀを保存するために､メモリーの残存量によっては古い ﾌｱｲﾙ を削除する必要のある時がある｡ その場合は､clear memory を選ぶ｡ 何の ﾌｱｲﾙ を消すのかの ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ が出る(Fig 2-6)｡ 消去するファイルの番号を入力すると､その番号以後のファイルすべてが消去される｡たとえば５を入力すると５から１０番のファイルすべてが消去される（Fig. 2-7）.
2.4.1.4 Set Time / Date
FMSには、 "Local" ﾓｰﾄﾞ の際､日時を記録するために使う ﾀｲﾐﾝｸﾞ ﾁｯﾌﾟ が内蔵されている｡ Set Time / Dateで､この ﾁｯﾌﾟ の情報を修正する｡ ｿﾌﾄからは先ず､FMSの時間 をPCに合わせる様 ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ が出る｡ それが駄目な時は､prompt box に適当な 情報を入れる｡
2.4.1.5 Config settings
この ｻﾌﾞﾒﾆｭｰ には､本機の使用する現在の変調 ﾋﾞｰﾑ と増幅(ｹﾞｲﾝ)設定の情報が入っている。大抵の状況で使える､初期設定は､始めて ｿﾌﾄ を実行する時､自動的にﾛｰﾄﾞ される(Fig. 2-9)｡ 設定の適､不適を確認する為､実験の前に2.3項のﾃｽﾄ を実行する｡ ｾｯﾃｲﾝｸﾞ の調整は､プログラムを終了するときMODFLUOR.INI ﾌｱｲﾙ に書き込まれ､その ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ が次に実行される時､再度適用される｡ 一旦本機を設定したら､出来れば､その ﾃﾞｰﾀ が明確に表示される様に､ｿﾌﾄ をｾｯﾄ すると､便利である｡ その ｵﾌﾟｼｮﾝ は View ﾒﾆｭｰ にある｡
2.4.2 View Functions
ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ を始めて実行すると､その 初期値 画面 には､ﾓﾆﾀﾘﾝｸﾞ ﾊﾞｰ(図2ｰ1の B) と ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ(図2-1の D)が表示される｡残りの画面は､ﾃﾞｰﾀ の記録部分に当てられる｡ 記録が終わると､ﾓﾆﾀﾘﾝｸﾞ ﾊﾞｰ の必要は無くなる｡ View ﾒﾆｭｰ で､それらを個々に無効に出来る｡ 項目の左のﾏｰｸ が表示されている事を示す｡ その項目を ｸﾘｯｸ すると､ﾏｰｸ が消えて､無効に成る｡
ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ｳｲﾝﾄﾞ もView ﾒﾆｭｰから選択する｡ このウインドは、測定が ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ から開始された時､ 蛍光 ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ を記録するための別の ｳｲﾝﾄﾞ である｡ この ｳｲﾝﾄﾞ は､都合の良い位置にﾄﾞﾗｯｸﾞ して､ ﾎﾞｯｸｽ を拡大することができる（図2-10） ｡ 必要の無い ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ は､ﾏｳｽ で ﾊｲﾗｲﾄ して､ "Delete" ｷｰ を押せば消せる｡ ﾃﾞｰﾀ ﾘｽﾄ が ｳｲﾝﾄﾞ に入りきらない時は､ｽｸﾛｰﾙ ﾊﾞｰ で必要なデータを探す｡ ｳｲﾝﾄﾞ 内の全ての ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ は､Files ﾒﾆｭｰ のParams to clipboard機能で Windowsのclipboardにｺﾋﾟｰ して､別のソフトのファイルに貼り付ける為に､ ｴｸｽﾎﾟｰﾄ出来る（ワープロのコピー、貼り付け機能と同じ）｡FMSにより測定できる､個々のﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ に就いては 2.6.3 で説明する｡
2.4.3 Graph Functions
初期設定は、ﾃﾞｰﾀ 記録画面が、0から2 分間の､本機の最大蛍光検知範囲 を表示する様になっている｡ ２分間を超える実験の ﾃﾞｰﾀ は､記録中自動的に ｽｸﾛｰﾙ されるので､ ﾃﾞｰﾀ の一部は画面 から外れる｡ ﾁｬｰﾄ ﾚｺｰﾀﾞｰモードで不要なﾃﾞｰﾀ を除く為､この ﾒﾆｭｰ には､記録中或いは記録後使うことのできる幾つかの ｺﾏﾝﾄﾞ がある｡
2.4.3.1 Clear
記録画面 と､ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ｳｲﾝﾄﾞ の全ての ﾃﾞｰﾀ を消す時､この ｺﾏﾝﾄﾞ を使う｡ ﾌﾛｯﾋﾟｰ か ﾊｰﾄﾞ の ﾃﾞｰﾀ ﾌｱｲﾙ に ｾｰﾌﾞ されていないと､その ﾃﾞｰﾀ は失われる｡ この ｺﾏﾝﾄﾞ を使った時は､ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ が出て注意する｡
2.4.3.2 Autoscale
現在記録された全ての ﾃﾞｰﾀ を､1つの 画面 に収める為に､この機能で蛍光と時間軸を ｾｯﾄ し直す｡ ﾁｬｰﾄ ﾚｺｰﾀﾞｰモード記録の後でスクロールしないようにするために､この機能は何時でも使える｡
2.4.3.3 Zoom
この機能を選んだら､ﾏｳｽ をデータ記録画面の希望の位置に動かす｡ｶｰｿﾙ で ｽﾞｰﾑ する部分を決めるために ﾄﾞﾗｯｸﾞ している間､ﾏｳｽ の左 ﾎﾞﾀﾝ は､押し続ける｡ 拡大部分がﾃﾞｰﾀ 記録部分一杯になる前に､ｽﾞｰﾑ する部分を囲むboxが作られる｡
2.4.3.5 Set Axis
手動での縦軸横軸設定とその他の ﾌﾟﾛｯﾄ の操作は､この ｻﾌﾞﾒﾆｭｰ で行う｡ 両軸の画面上の ﾚﾝｼﾞ設定は､軸設定 "edit" 欄 の各 ﾃﾞｰﾀ範囲の､"Start"と"End"値を入れると､希望の ﾄﾚｰｽ をｽﾞｰﾑすることが出来る｡ その他の表示の機能としては､目盛り線の制御とか､ﾃﾞｰﾀ を各 ﾃﾞｰﾀ ﾎﾟｲﾝﾄ でﾌﾟﾛｯﾄ するか､記録計のように実線でかくことにするかの選択がある｡
注： パルス は短いので､各 パルスごとにﾌﾟﾛｯﾄ される ﾃﾞｰﾀ ﾎﾟｲﾝﾄ の数は少ない｡個々の ﾃﾞｰﾀ ﾎﾟｲﾝﾄ が ﾌﾟﾛｯﾄ されると､その ﾄﾚｰｽ が ｽﾞｰﾑ されないと､その パルス を見極めることが困難な時がある｡
記録された個々の ﾃﾞｰﾀ ﾎﾟｲﾝﾄ は､Tool ﾒﾆｭｰ からみることができる｡
2.4.4. Tools この ﾒﾆｭｰ には､A/D ｺﾝﾊﾞｰﾀｰからの生の ﾃﾞｰﾀ 出力に関する事項が入っている｡
2.4.4.1 Tabulate この機能を選べば､記録中､或いは記録後､生の ﾃﾞｰﾀ を表の形で出力することができる｡ 各 ﾃﾞｰﾀ ﾎﾟｲﾝﾄ の 数値が､1列に10個ずつ時間に対応して表示される｡ ﾄﾚｰｽ全体の動きは､ｽｸﾛｰﾙ ﾊﾞｰ で追える｡ﾃﾞｰﾀ は､Files ﾒﾆｭｰ のData to clipboard機能で別のWindows プログラムに貼り付ける為に､ｴｸｽﾎﾟｰﾄ 出来る｡ ﾄﾚｰｽ の ｲﾍﾞﾝﾄ ﾏｰｸ に対応する ﾃﾞｰﾀ ﾎﾟｲﾝﾄ は､ｶﾗｰ ｺｰﾄﾞ ﾗﾍﾞﾙ で色分けされる｡それぞれのｲﾍﾞﾝﾄ ﾏｰｶｰ の色分けは､ﾕｰｻﾞｰ が決められる｡
2.4.4.2 Event marker color FMS光源を ｻﾝﾌﾟﾙ に当てた時と､外した時の ｲﾍﾞﾝﾄ ﾏｰｸ は､作用光､パルス 光､ 遠赤外光に別々の色の矢印を付けて､ﾃﾞｰﾀ 画面 上に示される｡ 初期値 の色と ﾃﾞｰタﾀｯｸﾞは､黄､白､赤で､ﾌﾞﾙｰ は､ﾕｰｻﾞｰの使う ｲﾍﾞﾝﾄﾏｰｶｰに残してある。
それぞれの ﾀｲﾌﾟ の ﾏｰｶｰ の色は､ｻﾌﾞﾒﾆｭｰ から適当な ﾀｲﾌﾟ を選び､ﾊﾟﾚｯﾄ の希望の色を ﾀﾞﾌﾞﾙ ｸﾘｯｸ し､OKを選んで決めることもできる｡ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ を ｼｬｯﾄﾀﾞｳﾝ した時の､最後の色の ｾｯﾃｲﾝｸﾞ が自動的にMODFLUOR.INI ﾌｱｲﾙ に ｾｰﾌﾞ され､次にFMSを使う時の､初期値となる｡
2.4.5 Data Handling and Export
実験が終わると､"Parameters Window"に記録されたﾄﾚｰｽが関連したﾊﾟﾗﾒｰﾀｰとともにﾃﾞｰﾀ記録画面に示される｡前の実験結果を再度検討することができるように､この情報を ﾃﾞｲｽｸ に記録しておく。
2.4.5.1 File Management With the Files Menu
この ﾒﾆｭｰ には､次の機能が入っている｡
FMSでは､制御 ﾕﾆｯﾄ の ﾒﾓﾘｰ に記録 されている ﾄﾚｰｽ ﾃﾞｰﾀ の転送に"Modfluor"を使う｡ (Upload to screen, Upload to file) これらの機能に就いては､第３章の"Local mode"で述べる｡
2.4.5.1.1. Save data
ﾃﾞｰﾀ は､この機能を使って､ﾌﾛｯﾋﾟｨｰ 又は ﾊｰﾄﾞ に記録出来る｡ "Save data" prompt box で､記憶する媒体を決めるためのﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄが出る｡ﾏｳｽ を使って記録する ﾄﾞﾗｲﾌﾞ と ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ を指定し､File name boxにﾌｱｲﾙ名をﾀｲﾌﾟする｡ OK ﾎﾞﾀﾝ を押して､そのboxを閉じ､"File description" prompt boxを開く｡ﾃﾞｰﾀの取り出し ｻｰﾁ が出来る様に､250文字迄のﾃｷｽﾄを､そのﾌｱｲﾙに概要 として付けられる｡終了すると､ﾄﾚｰｽ と ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ﾃﾞｰﾀ は､*.DAT ｴｸｽﾃﾝｼｮﾝ を付けて､ﾌｱｲﾙ に記録 される｡
2.4.5.1.2 Load Data
この機能を使って､ﾃﾞｰﾀ ﾌｱｲﾙ をFMSプログラムで使用することができる｡既に一つのﾄﾚｰｽが画面に出ている時は､そのﾃﾞｰﾀに上書きするかどうかを確認するﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ が出る｡先ず､"Load data" prompt boxで ﾌｱｲﾙのある場所を決めて､開くﾌｱｲﾙを選ぶ｡例では､C: ﾄﾞﾗｲﾌﾞ のFMS ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰに記録 されている､fr720.datﾌｱｲﾙをﾛｰﾄﾞする様にｾｯﾄされている｡OK ﾎﾞﾀﾝ を選ぶと､さらにprompt boxが開いて､ｾｰﾌﾞ された時､その ﾌｱｲﾙ に付けられた概要が表示され､ロードするかどうかの確認を求めてくる｡確認すると､その ﾌｱｲﾙ が ﾃﾞｰﾀ 記録部分に ﾛｰﾄﾞ され､ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ｳｲﾝﾄﾞは更新される｡
2.4.5.1.3 Text search
ﾌｱｲﾙ 名を忘れた時､この機能を使って､その ﾌｱｲﾙ の概要を検索する｡選択すると､"File notes" prompt boxが出る｡ 先ずBrowse ﾎﾞﾀﾝ を使って､ﾄﾞﾗｲﾌﾞ と ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ構成を見て､ｻｰﾁ ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ を ｸﾘｯｸ して選び､OKを選ぶ｡次に､希望の ﾃｷｽﾄ を入れるか､初期値のﾜｲﾙﾄﾞｶｰﾄﾞ (*)を使う｡"Search" ﾎﾞﾀﾝ を押すと､検索が始まる｡例では､C:＼FMS ﾃﾞｲﾚｸﾄﾘｰ の全ての ﾌｱｲﾙ が､"720"という文字列にたいして検索された｡ﾚﾌｱﾚﾝｽ に"720"の付く ﾌｱｲﾙ は1つだけで､その ﾌｱｲﾙ 名は(FR720.DAT),概要は､(F-RED 270, 40 ACTINIC UNITS)とsearch results windowに示される｡
2.4.5.2 Exporting Data to Other Windows Applications
"PC mode"実験の最後に､ﾃﾞｰﾀ記録画面に､2つの ﾀｲﾌﾟ の情報が入る｡ﾄﾚｰｽ ﾃﾞｰﾀ は記録計に記されるのと同様に表示され､ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ﾃﾞｰﾀ は"Parameters window"に記録される｡それらの情報は共に､Params to clipboardとData to clipboard機能で､別のｱﾌﾟﾘｹｰｼｮﾝ に貼り付ける為にWindows clipboardに「切り取り」したり､Params to ASCII とData to ASCII機能で､ASCII ﾌｱｲﾙ に「貼り付け」出来る｡
2.4.5.2.1 Params to clipboard and Params to ASCII
この機能を選ぶと､"Parameters window"の内容が､ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ に ﾃｷｽﾄ として､ｺﾋﾟｰ される｡ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞの更新 された内容は､ﾃﾞｰﾀ 分析やLotusやExcelの様な､ｽﾌﾟﾚｯﾄﾞｼｰﾄ に貼り付けるのに適する｡次の例では､Microsoft Excelで説明されるが､全てのWindowsｱﾌﾟﾘｹｰｼｮﾝに就いてその手順は基本的に同じである｡記録が終了したら､Params to clipboard機能を選ぶ。全ての ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ が自動的に ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ に ｺﾋﾟｰ される｡次にALT + TAB ｷｰ を使って､目的のソフトに切り換える｡その ｱﾌﾟﾘｹｰｼｮﾝ が未だ実行されていない時は､Program Manager (Win 3.x)又はtaskbar (Win95)で立ち上げる｡ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ の内容が､目的のソフトのファイルに貼り付けられる｡Excelの場合は､"paste"機能がEdit ﾒﾆｭｰ にある｡ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ の内容が ｽﾌﾟﾚｯﾄﾞｼｰﾄ現れるはずである｡
ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ は､測定順に､最後のものが ﾘｽﾄの最後に来る様に､表示される｡この基本的書式では､幾つもの反復実験からの ﾃﾞｰﾀ は､同じ ｽﾌﾟﾚｯﾄﾞｼｰﾄ 内で､以前の ﾃﾞｰﾀ の隣に貼り付けられる｡ｽﾌﾟﾚｯﾄﾞｼｰﾄ の1つの列に､反復 ﾃﾞｰﾀ が並ぶので､平均と標準誤差の計算は､適当な公式を ﾀｲﾌﾟ し､含める反復 ﾃﾞｰﾀ の範囲を選択するだけで済む｡1番上の列の分析が完了すれば､次からの列の計算は､Fill Down ｺﾏﾝﾄﾞ を使って自動的に行える｡
Params to ASCII機能が､Parameters Windowの内容を､ﾕｰｻﾞｰが名付けたASCII ﾌｱｲﾙ に､2 列､ｺﾝﾏ 区切りの書式で書き込む｡
Parameter label, Value
Fo, 400 etc.
この様な ﾌｱｲﾙ は､大抵のDOSとWindowsの ﾃﾞｰﾀ ﾊﾟｯｹｰｼﾞ に列として ｲﾝﾎﾟｰﾄ することができる｡
2.4.5.2.2. Data to Clipboard and Data to ASCII
記録計モードでデータトレースとして表示される蛍光の生 ﾃﾞｰﾀ も､Data to clipboard ｺﾏﾝﾄﾞ でｴｸｽﾎﾟｰﾄ 出来る｡その機能は､ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ｴｸｽﾎﾟｰﾄ と同じ様に､数値を ﾃｷｽﾄ ｽﾄﾘﾝｸﾞ として転送する｡ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ の内容を貼り付ける手順は変わらないが､ﾃﾞｰﾀ の量が多いので､ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ に何度も貼り付ける作業が必要になる｡ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ に貼り付ける時は､ｿﾌﾄ が転送する ﾃﾞｰﾀ範囲の､最初と最後のﾃﾞｰﾀ ﾎﾟｲﾝﾄを入力するように指示する｡指定した範囲 が小さければ､一回の作業で､全ての ﾃﾞｰﾀ を､ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ に貼り付けられるが､大き過ぎる時は､出来るだけ多くの ﾃﾞｰﾀ を貼り付け､最後の データ点の番号を表示する｡次に､その ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ の内容を､destination applicationに貼り付けてから､先に表示 された ﾃﾞｰﾀ 番号を､2番目の最初のデータとして使い､2番目の ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ に貼り付ける｡最大長の ﾄﾚｰｽ を貼り付けるには､４回の繰り返しが必要になる｡
連続した読みとしてﾃﾞｰﾀ は､目的のソフトの１つ欄の中に貼り付けられる｡ﾃﾞｰﾀ ﾎﾟｲﾝﾄ は､0.11秒毎に記録 されるので､時間情報の列を､最初の ﾃﾞｰﾀﾎﾟｲﾝﾄの隣のｾﾙに､0.11と入れ追加する（A2, Figure 1-23）｡式(=A2+0.11)を下方のｾﾙにコピーすると、全ての ﾃﾞｰﾀ の時間情報として使用出来る｡
この書式にすれば､その ﾃﾞｰﾀ をX Y ﾌﾟﾛｯﾄ として､簡単に表示出来る｡
Data to ASCII機能により､ﾕｰｻﾞｰ の名付けたASCIIﾌｱｲﾙに, 2列､ ｺﾝﾏ 区切り書式で全てのﾄﾚｰｽ ﾃﾞｰﾀ を記録する｡
Time of reading Signal value (bits)
(sec.)
0.11， 100
0.22, 101 etc.
この様な書式のﾌｱｲﾙ は､大抵のDOSやWindowsのソフトへのデータ変換が可能である｡
ﾃﾞｰﾀ 画面 と"Parametes Window"の内容が､Print graphとPrint paramsｺﾏﾝﾄﾞ で､大抵のwindows ﾌﾟﾘﾝﾀｰで印刷出来る｡この ｵﾌﾟｼｮﾝ を選ぶと､print dialog boxに通常使うプリンター表示され、選んだ ﾌﾟﾘﾝﾀｰに依って､ｶﾗｰ か ﾓﾉｸﾛ の印刷が選択出来る｡選ばれている ﾌﾟﾘﾝﾀｰ の ｾｯﾃｲﾝｸﾞ は､Setup ﾎﾞﾀﾝを選択し､"Print setup" dialog boxで変更出来る｡（日本語プリンターの場合、「プロパティー」と「オプション」で設定する）。Print graph機能は､ﾃﾞｰﾀ 記録部分の境界内に表示される､全ての ｸﾞﾗﾌ 情報とｲﾍﾞﾝﾄ ﾏｰｶｰ を ﾌﾟﾘﾝﾄ し､Print params機能は､ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ を記録した順に､１列に出力する｡ﾌﾟﾘﾝﾄ 出力の ｻｲｽﾞ も又､Set printer page機能で､その ﾍﾟｰｼﾞ 上のﾃﾞｰﾀ の面積に合わせて､調節出来る｡初期値 の ｾｯﾃｲﾝｸﾞでは､ﾏｰｼﾞﾝ は最小である｡ ﾌﾟﾘﾝﾄ 面積は､"Auto Height" option boxを ｸﾘｯｸ して､高さと幅を変更出来る｡ﾌﾟﾘﾝﾀｰ ﾍﾟｰｼﾞ ｾｯﾃｲﾝｸﾞ は､Print graph､Print params両機能に適用される｡
2.5 Instrument Programming Via User-Defined Scripts
FMSはHansatech Scripting Language (HSL)と平行して開発された｡HSLは､ﾕｰｻﾞｰ の決める最大6つの事象の制御 / 測定の ｼｰｹﾝｽ (ﾌﾟﾛﾄｺｰﾙ 又はｽｸﾘﾌﾟﾄ)を予め本機にﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑする簡単で便利な方法である｡一旦 ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ されると､その ﾌﾟﾛﾄｺｰﾙ は､野外の"Local mode"でもWindows ｿﾌﾄ からもｷｰを1回押すだけで操作出来る｡"dorop-down" ﾒﾆｭｰ Script機能で､ﾌﾟﾛﾄｺｰﾙ の作成と編集用のScript Editorと､"PC ｍode"で使用する ｺﾏﾝﾄﾞ を記録するScript Recorder、Windows操作用のscript Run ｺﾏﾝﾄﾞに ｱｸｾｽ 出来る｡
2.5.1The Script Recorder
Script Recorderの原理は､ｽﾌﾟﾚｯﾄﾞｼｰﾄ で見られる"Macro Record"機能と良く似ている｡作動状態にすると､Script Recorderは実験中 ﾕｰｻﾞｰ の出す各 ｺﾏﾝﾄﾞ の順番とﾀｲﾐﾝｸﾞ を記録し､再生時それを正確に反復するｽｸﾘﾌﾟﾄ を自動的に作る｡Script Recorder は､Script ﾒﾆｭｰ のRecord ｵﾌﾟｼｮﾝ を ｸﾘｯｸ して､on/offする｡チェックの印は、ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ の"Record button"を押しすと、新しい記録が始まると同時に､そのrecorderが動作する様に ｾｯﾄ されている事を示す｡
ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ からその実験が停止されると､ｽｸﾘﾌﾟﾄ の記録も自動的に停止する｡その新しく記録された ｽｸﾘﾌﾟﾄ を ﾛｰﾄﾞ する前に､現在 ﾛｰﾄﾞ されている ｽｸﾘﾌﾟﾄに上書きするかどうかを確認するﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄが現れる｡ﾛｰﾄﾞされたら､その ｽｸﾘﾌﾟﾄ を見たり､実行したり､ﾌｱｲﾙ に ｾｰﾌﾞ したり､ｽﾌﾟﾘﾌﾟﾄｴﾃﾞｲﾀｰ を使って､編集出来る｡
注： ｺﾏﾝﾄﾞ 命令文間の時間間隔は常に､ｽｸﾘﾌﾟﾄ ﾚｺｰﾀﾞｰ が適当な間隔のWAIT ｴﾚﾒﾝﾄ と解釈する｡ "Local mode"でより都合の良い､幾つかの異なった ﾀｲﾌﾟ の"Script pause" ｴﾚﾒﾝﾄ がある｡ これらは､script editorを使って､手動で､記録した ｽｸﾘﾌﾟﾄ に編集しな ければならない
｡
2.5.2Running a script Under Windows
Run ｺﾏﾝﾄﾞ で､ｽｸﾘﾌﾟﾄｴﾃﾞｲﾀｰ に ﾛｰﾄﾞ されている現在の ｽｸﾘﾌﾟﾄを、ﾃﾞｰﾀ 記録領域と ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ｳｲﾝﾄﾞ にある ﾃﾞｰﾀ を使って実行する｡
大抵の ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄ (補足A)は､"Local mode"で制御boxから実行されるか､Windows ｿﾌﾄ で操作されるかを問わず､同じ様に動作する様設計されている｡然し､Script Pauseと ﾌﾟﾛｯﾄ 認識 ｴﾚﾒﾝﾄ の解釈の仕方に､幾つかの例外がある｡それらの違いは､異なった動作環境を考慮する上で必要で､ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾃﾞｲﾀｰ でｽｸﾘﾌﾟﾄ を作る際､考慮する必要がある｡
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ｴﾚﾒﾝﾄ |
Windows Operation |
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WAIT |
指定した期間､ｽｸﾘﾌﾟﾄ停止 |
決まった期間､次の ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄの実行が遅れる |
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WKEY |
SPACE-BARが押される迄､次のｽｸﾘﾌﾟﾄ は無期限に停止 |
ｷｰ が押される迄､ 次のｽｸﾘﾌﾟﾄ の実行が遅れる |
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WMON |
SPACE-BARが押される迄､次のｽｸﾘﾌﾟﾄ は無期限に停止 |
新しく入力した蛍光のﾚﾍﾞﾙは 表示されるが､ｷｰ が押されまで次のｽｸﾘﾌﾟﾄｴﾚﾒﾝﾄの実行は遅れる |
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WLEV |
信号が決めた値より小さくなる迄、ｽｸﾘﾌﾟﾄ は無期限に停止 |
信号の変化量が､決めた値より小さくなる迄､次のｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄの実行は遅れる |
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ID |
無し |
ｽｸﾘﾌﾟﾄ がLocal modeで実行されるときは､ﾌﾟﾛｯﾄ認識情報を入力する必要がある |
TEXT: Press SPACE-BAR
WKEY:
CLR:
2.5.3 The Script Editor
ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾃﾞｲﾀｰ はｳｲﾝﾄﾞで その内容が ﾘｽﾄ され､ｱｲｺﾝにより示されているﾂｰﾙで編集が出来る｡ ｽｸﾘﾌﾟﾄ ﾀｲﾄﾙ はtitle box (A)に､ｺﾏﾝﾄﾞ ﾗｲﾝ 或いは ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄ はその下のbox (B) に表示される｡ それ以外の ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄ は､選択した ｱｲｺﾝ (C)を ﾄﾞﾗｯｸﾞ して加える｡ 夫々の ｽｸﾘﾌﾟﾄ は､FMSに ﾛｰﾄﾞ された際の識別に使うtitle box (A)と､実験の時 順次実行される ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄ の並び(B)の2つの部分から成る｡ 編集､ﾀﾞｳﾝ ﾛｰﾃﾞｲﾝｸﾞ､と ｽｸﾘﾌﾟﾄ ﾌｱｲﾙ ﾊﾝﾄﾞﾘﾝｸﾞ 機能は､ﾄﾞﾛｯﾌﾟﾀﾞｳﾝ ﾒﾆｭｰ に入って いるので､2頁に亙る､ｱｲｺﾝ 化された ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄ (C)から ﾄﾞﾗｯｸﾞ して加える｡ ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾃﾞｲﾀｰ の原理を理解する為に､何か1つ ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｻﾝﾌﾟﾙ を作るのが良い 方法である｡
'drop-down' ﾒﾆｭｰ の Files groupから､新しい ﾌｱｲﾙ を作る｡ editorが(最大10文字迄の) ｽｸﾘﾌﾟﾄ ﾀｲﾄﾙ の ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ を出す｡ この ﾀｲﾄﾙ は､それが ﾀﾞｳﾝﾛｰﾄﾞ された後､ FMS表示 画面 での識別にも使う｡ 従って､ﾀｲﾄﾙ は出来るだけ解り易いことが必要である｡ この例の場合､タイトルは"Test"である｡ 各 ｽｸﾘﾌﾟﾄ の始めに､一対の重要な ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄ が､自動的に付く｡それは､本機の増幅と変調 ﾋﾞｰﾑ の強さを ｾｯﾄ する GAINとMODである｡ｴﾃﾞｲﾀｰ は次の書式で全てのｽｸﾘﾌﾟﾄｴﾚﾒﾝﾄをﾘｽﾄする：
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Name of script elements: Element Parameters: |
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GAIN: 50 MOD: 3 |
ｽｸﾘﾌﾟﾄｴﾚﾒﾝﾄは 名前と( ： )の後に､その機能を規定する数値ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰを付けて表示される｡ 上記の場合､Gainは本機の ｾｯﾃｲﾝｸﾞ に50を与え､変調 ﾋﾞｰﾑ は3に ｾｯﾄ される｡ それ以外の ｴﾚﾒﾝﾄ は､希望する実行順に ｽｸﾘﾌﾟﾄ に加えられる｡ 使えるｴﾚﾒﾝﾄは､作成中のｽｸﾘﾌﾟﾄの横に、表示される２頁分のｱｲｺﾝで示される｡ １頁目には､作用光制御の様な事象制御と､ｽｸﾘﾌﾟﾄ 継続前に待つ､"wait for X secs"や "wait for instruments key press"の様な事象 ﾀｲﾏｰ が入り､２頁目には､温度､PARおよび一般の蛍光ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰなど直接の測定機能が入る｡ Script Editorにより､個々の ｴﾚﾒﾝﾄ を希望の順に並べ､複雑な実験を、野外でPC無しでも､FMSのｷｰを一押しすることで実行したり､Windows ｿﾌﾄ で自動的に実行することができる｡
個々のｽｸﾘﾌﾟﾄｴﾚﾒﾝﾄ､制御事象とそのﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ､作動中に測定されるﾃﾞｰﾀなどの完全な説明は､補足Aに ﾘｽﾄされている｡ 各 ｴﾚﾒﾝﾄ は独立した ﾕﾆｯﾄ で､GAINとMODの後ならば､ｽｸﾘﾌﾟﾄ 内の希望の位置に挿入出来る｡
以下の例では､簡単な光 ﾚｽﾎﾟﾝｽ 測定の ｽｸﾘﾌﾟﾄ が作られ､実験室に帰ってから､その実験の完全なチャート表示が出来る様に､全てのﾄﾚｰｽ ﾃﾞｰﾀを記録するコマンドをFMSに与える｡ 又FMSは､ID ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄと実験 ﾌﾟﾛｯﾄ 識別情報を入力要求の表示をするようにｾｯﾄ出来る｡
新しい ｽｸﾘﾌﾟﾄ ﾌｱｲﾙ を作ったら､次にそのID ｴﾚﾒﾝﾄ を選ぶ｡ "Page 1" ﾀﾌﾞ を ｸﾘｯｸ して､目的のｱｲｺﾝ頁を開き､ﾏｳｽのｶｰｿﾙをIDｱｲｺﾝに合わせれば､この機能が追加される｡ 数秒後､黄色のboxがそのｱｲｺﾝ の下に自動的に現れ､そのｱｲｺﾝに関する情報を表示する｡ ﾏｳｽ の左 ﾎﾞﾀﾝ を押したまま､そのID ｱｲｺﾝ を､ｽｸﾘﾌﾟﾄ 内のMOD ｴﾚﾒﾝﾄ の下に ﾄﾞﾗｯｸﾞ して､ﾎﾞﾀﾝ を離せば､その ｴﾚﾒﾝﾄ が入る｡ ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄboxが開いて､M,N値を要求する｡ これは､作業数(M)と､繰り返しの数(N)である。 従って､5,5とすると､繰り返し5回の5作業で25のﾌﾟﾛｯﾄ測定を意味する｡ 入力すると､次の ﾗｲﾝ が ｽｸﾘﾌﾟﾄ に追加される：
ID : 5,5
この ｽｸﾘﾌﾟﾄ を "Local mode" で実行すると､ｽｸﾘﾌﾟﾄが実行され､ FMSがプロットすると入力ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ出す｡ 第1回の実行では､その 初期値 番号は1､1で､treatment 1,replicate 1に相当する｡ これを認めるか､別の ﾌﾟﾛｯﾄ IDを入力する｡入力した ﾌﾟﾛｯﾄ 情報は､測定の終わりに､ﾌｱｲﾙ に ｾｰﾌﾞ され､その ﾃﾞｰﾀ が ｱｯﾌﾟﾛｰﾄﾞ された時､ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ｳｲﾝﾄﾞ に表示される｡ 次にその ｽｸﾘﾌﾟﾄ が実行された時､その 初期値 ﾌﾟﾛｯﾄ 番号は自動的に増える｡ (1,2 1,3 1,4 1,5 2,1 等)。
ｽｸﾘﾌﾟﾄに加える次の ｴﾚﾒﾝﾄ は､パソコンにデータを移し詳しく分析する為の､ﾄﾚｰｽ ﾃﾞｰﾀ を 全て記録する ｺﾏﾝﾄﾞ である｡ LOG ｴﾚﾒﾝﾄ (ｸﾘｯﾌﾟﾎﾞｰﾄﾞ と ﾍﾟﾝ ｱｲｺﾝ)は､ID ｴﾚﾒﾝﾄ の下に ﾄﾞﾗｯｸﾞ して､ ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ box に ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ "1"と入力しなければならない｡ ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ "0" のLOG ｴﾚﾒﾝﾄ は､ｽｸﾘﾌﾟﾄ 中で停止させる時に使える｡ 例題のｽｸﾘﾌﾟﾄ では､記録は ｽｸﾘﾌﾟﾄ の終わる迄続けられる｡ 従って、次の ﾗｲﾝ が加わる：
LOG : 1
ｾｯﾄｱｯﾌﾟ ｴﾚﾒﾝﾄ の入力を終了後、測定 ｴﾚﾒﾝﾄを追加する｡ 最初は､暗順応させたFv/Fmの測定である｡ ｴﾃﾞｲﾀｰは､そのFv/Fm測定条件を指定するﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ値入力ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄと､ 大抵の測定に合う､初期値を示す｡
Fig. 2-30
Fv/Fmの測定には､Foを決める ﾃﾞｰﾀ の平均と､ Fmを決める為の飽和光 パルス の､2つの制御項目が必要である｡
|
Parameter: Definition: Defaullt Vallue: |
|
Duration- Period over which element runs 2.5 sec Intensity- Intensity of saturation light pulse 100 (1 ― 100 units) Pulse Width- Duration of light pulse(0.7 ― 5.0 sec) 0.7 sec |
FVFM : 2.5, 100, 0.7
ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰを指定しなければならないことにより､ｽｸﾘﾌﾟﾄ の作り方が複雑になるが､それに依って個々の条件に適した､固有の ｽｸﾘﾌﾟﾄ の作成が可能になり､本機の動作が最適化出来る｡各 ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄに関連する､ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰの全ﾘｽﾄを補足 Aに記載した｡ 次に､予め決めた ﾚﾍﾞﾙ で､作用光をon させる｡ これには､ｽｸﾘﾌﾟﾄ ｴﾚﾒﾝﾄ の頁1から､ "Actinic Light" ｱｲｺﾝ を､Fv/Fm測定の下に ﾄﾞﾗｯｸﾞ する｡ ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ が､初期値 30 ﾕﾆｯﾄ示し､照射強度のﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ を出す｡たとえば､10を入れ､Returnを押して､光強度を10 ﾕﾆｯﾄ に ｾｯﾄ すると、次の ｺﾏﾝﾄﾞ が追加される：
ACT : 10
通常、照射後直ぐ、蛍光信号は一連の変化を起こすが､光化学 ﾌﾟﾛｾｽ は明順応を始める。 測定は､ｻﾝﾌﾟﾙが ”定常状態”に達してから行うことが多い｡ ｽｸﾘﾌﾟﾄ言語には､色々の文脈に適した､waiting for a key-press from the user, waiting for a defined period of time, waiting for a digital input from some external apparatus,等､幾つもの "Wait" ｺﾏﾝﾄﾞ がある｡ この例では､"wait for a fixed period of time" ｺﾏﾝﾄﾞ を､ 頁1の時計 ｱｲｺﾝ を ｽｸﾘﾌﾟﾄ に ﾄﾞﾗｯｸﾞ して使う： ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ が秒単位の待ち時間の ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄ を出す｡
100秒の値を入力すると､次の ｺﾏﾝﾄﾞ ﾗｲﾝ が作られる：
WAIT: 100.0
100秒後､次の ｺﾏﾝﾄﾞ が実行される｡ これがPSII(φ PSII)の量子効率で､2頁目のｱｲｺﾝからスクリプトに加えることができる｡ PSII測定に必要な制御機能は､Fv/Fm測定のものと似ている｡従って同じタイプのパラメーターが使われる。別の値をパラメーターとして使うことも可能である。 初期値 ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰを使う時は､次のｺﾏﾝﾄﾞ ﾗｲﾝ を入れる：
φ PSII : 2.5, 100, 0.7
最終的なｽｸﾘﾌﾟﾄをFig. 2-33に示してある。 この例は､ｺﾏﾝﾄﾞ が8つだけの､簡単なものである｡ HSL(Hansatech Scripting Language)を ﾌﾙに使うと､30余りの ｽｸﾘﾌﾟﾄｴﾚﾒﾝﾄ が作れ､それを組合わせると､ 最大500 bytes (約80のFv/Fm ｴﾚﾒﾝﾄに等しい)の ｽｸﾘﾌﾟﾄ が出来る｡ 大きな ｽｸﾘﾌﾟ を処理する時は､編集と ﾌｱｲﾙ処理機能は､特に約立つ｡ それらは､"drop-down" ﾒﾆｭｰ から 使うことができる｡
この ﾒﾆｭｰ は､記録画面上のmain "drop-down" ﾒﾆｭｰ と同様の働きをする｡ それぞれのｺﾏﾝﾄﾞはｸﾞﾙｰﾌﾟに分けられ､機能を大まかに示すﾍﾃﾞｲﾝｸﾞにより使い分ける｡ Files, Download, Edit､3つの ﾍｯﾃﾞｲﾝｸﾞ がある｡
2.5.3.2.1 Edit
この ﾒﾆｭｰ には､ｽｸﾘﾌﾟﾄ上のｺﾏﾝﾄﾞのﾊﾟﾗﾒｰﾀｰを追加､削除又は変更に適したｺﾏﾝﾄﾞ が入っている｡ 一部の機能は､ｱｲｺﾝ群から新しいｺﾏﾝﾄﾞをﾏｳｽでﾄﾞﾗｯｸﾞして加えたり､屑篭に ﾄﾞﾗｯｸﾞ して､消したり出来る｡
2.5.3.2.2 Files
ｽｸﾘﾌﾟﾄ を作ったら､それを ﾃﾞｲｽｸ に保存する｡ Files ﾒﾆｭｰ の ｵﾌﾟｼｮﾝ を使って､*.SCRの形式ファイルとして保存したり､その形式のファイルから呼び出せる｡ Filesの操作は､2.4.5.1の説明内容と同じである｡
PCを使わなくても、最大6つのｽｸﾘﾌﾟﾄﾌｱｲﾙをFMSにﾀﾞｳﾝﾛｰﾄﾞし､"Local mode"により実行出来る｡ Download ﾒﾆｭｰでは､現在Script Editorに表示されているｽｸﾘﾌﾟﾄを､FMS制御ﾕﾆｯﾄの6つのﾌﾟﾛﾄｺｰﾙ保存メモリーへ転送する｡ 転送先は､ﾏｳｽかｱｸｾﾚﾚｰﾀｰ ｷｰでDownload ﾒﾆｭｰ から選ぶ｡ ﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄにより､ｽｸﾘﾌﾟﾄ 転送の結果が､制御 boxに表示される｡
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Download |
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Protocol1 Protocol2 Protocol3 Protocol4 Protocol5 Protocol6 |
本器を初めて使う時は､Fv/FmとφPSII を測定する､初期設定ｽｸﾘﾌﾟﾄの入っている ﾌﾟﾛﾄｺｰﾙ 1と2を使う｡ まだｽｸﾘﾌﾟﾄが使用されてはなく､従って測定 ﾃﾞｰﾀ が記録されたことのない時には､上書き可能である｡ FMSは､記録されたﾃﾞｰﾀの解釈に､ﾛｰﾄﾞ されたｽｸﾘﾌﾟﾄを使うので､このｾｰﾌｶﾞｰﾄﾞ は必須である｡ 本器からの ﾃﾞｰﾀ ﾌｱｲﾙ がＰＣに移されて､ﾒﾓﾘｰがｸﾘﾔｰ された時のみそのｽｸﾘﾌﾟﾄが保存されているメモリーの再使用が可能である｡
FMSを"PC mode"にすると､光源と測定の諸機能を､ﾂｰﾙﾊﾞｰ の ﾎﾞﾀﾝ で選べる｡
それらは4つの機能 ｸﾞﾙｰﾌﾟ に分けられる：
＊ 記録機能 (A)
＊ 光源制御 (B)
＊ 測定 ｺﾏﾝﾄﾞ (C)
2.6.1 Recording Functions
これらの機能は､"Record" ﾎﾞﾀﾝ で始める｡又､そのｽｸﾘﾌﾟﾄにおいて記録機能がﾁｪｯｸ されている時は､蛍光検知に必須の変調 ﾋﾞｰﾑ もﾄﾘｶﾞｰ されて､実験中､ﾂｰﾙﾊﾞｰ に表示される一連の測定 ｺﾏﾝﾄﾞ の記録が始まる｡これは、"ﾏｸﾛ" ﾌﾟﾛｸﾞﾗﾑ を作る為に､使われたｷｰをｽﾌﾟﾚｯﾄﾞｼｰﾄ ｿﾌﾄ に記録することに似ている｡実験中､ﾃﾞｰﾀ は､ﾃﾞｰﾀ 記録 画面 に ﾌﾟﾛｯﾄ され､最大約50分､0．11秒毎に本機のﾓﾆﾀﾘﾝｸﾞ ﾊﾞｰ に表示される｡"Pause" ﾎﾞﾀﾝを使用して､新しい葉を光順応させている間のようなデータを保存する必要のない期間は､ﾃﾞｰﾀの記録を中止して､ﾒﾓﾘｰを節約すれば､実験をより長い時間実行出来る｡蛍光の測定値は､ﾃﾞｰﾀの記録を止めている間も､本器のﾓﾆﾀﾘﾝｸﾞ ﾊﾞｰに表示される｡
記録 ﾎﾞﾀﾝ もう一度押すと､記録は終了する｡全ての点灯中の光源は消え､ｽｸﾘﾌﾟﾄ の記録も停止する｡新しく記録された ｽｸﾘﾌﾟﾄ を､ﾒﾓﾘｰの現在開いている ｽｸﾘﾌﾟﾄに上書きしてもよいかを確認するﾌﾟﾛﾝﾌﾟﾄが出る｡スクリプトの新規作成、編集に関する詳細は2.5.3.1に記されている。
FMSは４つの光源を持ち､本器の ﾂｰﾙﾊﾞｰ から制御出来る｡
2.6.2.1 The Modulation Beam
大抵の実験では､変調 ﾋﾞｰﾑ は､記録の開始時にonし､終了時にoffする｡これは､"Record" ﾎﾞﾀﾝ で記録の開始と終了時に自動的に行はれる｡然し､実験中に､"Mod" ﾎﾞﾀﾝをｸﾘｯｸ すればoff出来る｡その時､蛍光信号は０に落ち､変調ﾋﾞｰﾑがonになる迄､そのﾚﾍﾞﾙのままになる｡すべての光化学作用をいったん止めることが必要な実験状況では､この機能は有用である。それを達成出来る唯一の確かな方法は､ｻﾝﾌﾟﾙ に当たる光をすべて遮断することである｡その条件下では、本機が蛍光信号を検知出来ないので､ﾃﾞｰﾀの記録を中断することは当然である｡変調 ﾋﾞｰﾑ は､"drop-down" ﾒﾆｭｰ のHardware機能に組み込まれている制御で､3つの強度のうちのどれかにｾｯﾄ出来る｡FMSの検知する蛍光信号は､ｻﾝﾌﾟﾙ に当たる光強度に正比例する｡実験中､光強度を一定に保つことに依ってのみ､ｻﾝﾌﾟﾙの光化学作用の変化をﾓﾆﾀｰ出来る｡記録中は､FMSの設定は変更できないので､実験を開始する前に､ﾃｽﾄ細胞組織片を用いて最適の変調強度に設定しなければならない｡
作用光は､ﾊﾛｹﾞﾝﾗﾝﾌﾟ を､電力を下げて駆動して与える。その出力 ﾚﾝｼﾞ は､（光ﾌｱｲﾊﾞｰ先端で測って）0から 3000 molm-2 s -1 で､"Actinic" ﾎﾞﾀﾝ の隣にあるedit boxに数値を入れることにより､50 ｽﾃｯﾌﾟのなかから選べる｡"Actinic" ﾎﾞﾀﾝは、クリックにより照射が始まり､もう一度 ｸﾘｯｸ してﾗﾝﾌﾟをoffする迄､凹んだままである｡ﾗﾝﾌﾟの照射強度を変更するには､一旦ランプをoffし､照射強度をedit boxに新しい数値を入れて､変更してから､再度onしなければならない｡作用光が照射されている間の､ｻﾝﾌﾟﾙの変調光吸収の量は無視出来る程度である｡従って､変調蛍光の度合
2.6.2.3 The Saturating Light Source
いに目立った影響を与えることなく､変調 ﾋﾞｰﾑのパルス ﾚｰﾄを増やすことが可能である｡FMSは自動的に､本機のS/Nを最良にして動作する｡総合して、毎秒10のﾃﾞｰﾀの記録回数を維持する為に､このﾌﾟﾛｾｽでのそれ以上のﾃﾞｰﾀ は平均される｡
内蔵のﾊﾛｹﾞﾝ ﾗﾝﾌﾟ で､ｻﾝﾌﾟﾙ に飽和 パルス を与える｡パルス は､"Pulse" edit boxに180から18,000 μmolm -2 s -1の間の強さを100段階でｾｯﾄ出来る｡ 最小の パルス 継続期間は､0.3 sec.で､0.1 sec.増分で5 sec.迄伸ばせる｡ この期間は､二番目の"Pulse" edit box に数値を入れて､決める｡
パルス は､パルスを用いる測定を行うためのﾎﾞﾀﾝ か､"Pulse" ﾎﾞﾀﾝ を押して開始する｡パルス ﾗﾝﾌﾟ点灯中は､ﾎﾞﾀﾝは若干凹んだままで､使用中である事を示す｡パルス 照射が終わると､ﾎﾞﾀﾝ は自動的に戻る｡
この光は､735nmに ﾋﾟｰｸ を持つLED光源から出る｡作用光源と同じ様に､"Far-Red" ﾎﾞﾀﾝで点火する｡周囲光や作用光源に比べて､その出力が小さいので､この ﾗﾝﾌﾟ を使用する時は､他の光によりその効力が阻害されない様､注意が必要である｡
2.6.3Measurement Functions
FMSには､一般に使用する蛍光測定実行の ﾙｰﾁﾝ が入っている｡一番一般的な蛍光 ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ は､暗順応された組織に対する測定と､周囲光或いは FMSの作用光の下で光合成を行っている組織に対する測定との､2つの異なったｸﾞﾙｰﾌﾟ に分類できる｡両方の測定は共に､本機の ﾂｰﾙﾊﾞｰ の適当な ﾎﾞﾀﾝ を押して開始する｡
暗順応は､すべての光に依る反応を止める｡かなり長い時間に渡り光化学反応が止まる結果､PSII電子ｱｸｾﾌﾟﾀｰ分子の完全な再酸化が起こり､PSII反応センターが空くので､吸収された光を光化学反応に使用出来る度合いが最大になる｡この状態の組織を用いて取られたﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ は通常､PSIIの最大量子効率の計算に使われ､光順応ｻﾝﾌﾟﾙの測定の対照に使われる｡
Foは､暗順応により、すべてのPSII反応センターと電子ｱｸｾﾌﾟﾀｰ分子が､完全に酸化され､光化学反応に使われる状態になった時の蛍光収量と定義される｡従って、Foは､変調ﾋﾞｰﾑのみが照射される､実験の最初に測定されることが多い｡
"Fo" ﾎﾞﾀﾝ で､1.6秒間の ﾃﾞｰﾀ が平均され､その結果が ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ ｳｲﾝﾄﾞ にFoとして記録 される｡この機能で､そのｻﾝﾌﾟﾙが完全に暗順応されたかどうかを決める事は出来ない｡本機が通常の光のある所で使われたり､変調 ﾋﾞｰﾑ が､かなりの光化学反応を引き起こす程強い時は､その記録 されたFo値は､Foの一般的な定義に当てはまらない｡
暗順応された ｻﾝﾌﾟﾙ が､強い飽和パルス光に曝されると､Fmが得られる｡これに依って､すべてのPSII電子ｱｸｾﾌﾟﾀｰが還元され、PSII光化学反応が一時的に止まる｡吸収したエネルギーｰ を光化学反応と取り合うことが､一時的に無くなるので､そのｻﾝﾌﾟﾙから最大の蛍光が出る｡"Fm" ﾎﾞﾀﾝで､"Pulse" edit box で指定した､強度と期間を使った飽和 パルス 光の照射が始まる｡パルス照射中､その蛍光の上昇が ﾓﾆﾀｰ され､一番高い2点の平均が､ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰｳｲﾝﾄﾞにFm値として記録 される｡その結果､表示されるFm値は､ﾌﾙﾃﾞｰﾀｾｯﾄに表式される最大蛍光値と若干異なる｡この手順は､測定の精度に響く､ランダムﾉｲｽﾞ の影響を最小に押さえる為に使う｡
FoとFm蛍光収量の差は､その ｻﾝﾌﾟﾙ の消費する 光化学 エネルギーｰ に対する最大能力に比例し､可変蛍光（Fv)と定義される｡
Fig. 2-35 Fv/Fmの測定のための蛍光の追跡
暗順応(Fo)と光飽和(Fm)条件下の､組織内でエネルギーｰを競合する消費経路の比例定数の計算から､可変蛍光の最大蛍光に対する比率（Fv/Fm)が､PSII光化学反応の量子収率に正比例することが示されている｡多くの種の光化学反応の量子収率の計算でも､良い近似値が得られたので､Fv/Fmの使用が､ｽﾄﾚｽﾚｽﾎﾟﾝｽの判定ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰとして､広く使われている｡"Fv/Fm" ﾎﾞﾀﾝ で､Fo, Fm,の測定と､Fv, Fv/Fm計算の通常のプロセスが始まる｡
1. Fo決定の為､1｡6秒間､変調 ﾋﾞｰﾑ だけを照射したときのシグナルが平均される｡
2. Fm決定の為､飽和 パルス が加えられる｡
- Light-adapted measurement routines
光順応組織の場合は､PSII電子 ｱｸｾﾌﾟﾀｰ の一部は還元され、部分的にPSII反応センター は ”閉じる”。従って､吸収されたエネルギーｰの光化学反応に使われる割合は､非光化学ﾌﾟﾛｾｽ が働いているので､最大とはならない｡本機の ﾂｰﾙﾊﾞｰ で､これらの ﾌﾟﾛｾｽ の相対的な割合を決める ﾙｰﾁﾝ に ｱｸｾｽ する｡Fv/Fmの光順応の比の測定と併せれば､Genty etal,1989の ﾓﾃﾞﾙ を使って､PSII 量子効率(φPSII)を推定出来る｡
この ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ の計算には､種々の状態で､その ｻﾝﾌﾟﾙ の蛍光収量を測定する必要がある｡先ず､通常の光での蛍光量を求める。この場合､大抵は､ｻﾝﾌﾟﾙ を特定の光又は環境に順応させ､定常状態になった状態で測定する｡従ってその測定値は､”定常状態”の蛍光収量､Fs,と言われる｡次に､すべてのPSII反応 センター を”閉じる”為､飽和 パルス が必要となる｡PSII光化学反応が､一時的に禁止されるので､最大の蛍光収量､Fm,が得られる｡前にFv/Fmの暗順応測定が取られていれば､光化学と非光化学のクエンチング ﾌﾟﾛｾｽ の割合が､Schreiber et al, 1987 の公式から決められる｡φPSII 機能が､自動的に下図のboxに示される ﾌﾟﾛﾄｺｰﾙ を実行する｡
- PAR値と温度は､ﾘｰﾌ ｸﾘｯﾌﾟで測定され記録される｡ (ｸﾘｯﾌが接続されていない場合､この値は０である｡)
2. 定常状態の蛍光値(Fs)は､通常光下の蛍光信号を平均して決められる｡
3. "Pulse" edit boxで決めた､強度と間隔の飽和パルス が与えられ､Fmが､連続した最高値の平均として 記録 される｡
最後に､測定値､計算された ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ が､"Parameters Window"に表示される｡
クゥエンチング係数などの計算で得られる一部のﾊﾟﾗﾒｰﾀｰは､φPSII 測定機能に含まれていないデータを使って得られることに注意する｡従って､（他の測定ﾃﾞｰﾀ を参照しないので）正確で有効なφPSII測定値を得ることは可能であるが、（暗順応したFoとFmの測定を参照する事を要求する）クゥエンチング係数は計算の結果、無効な測定値を得ることもある。
1. Fmは必ず ≧Fm'
2. Fs は必ず ≧Fo
3. PAR ≧1 μmol･m -2 s -1 (PAR ｾﾝｻｰ 有無の効果的な ﾁｴｯｸ）
4. Fs は必ず ≦Fm'
求めた ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ の計算中に使った測定値が､上の ﾙｰﾙ に従っていない時は､計算された怪しい ﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ に､"?? calculated number"というフラッグが付く｡その様なフラッグの原因は､"Parameters Window"に在る"raw" ﾃﾞｰﾀ から､そのﾊﾟﾗﾒｰﾀｰ を手計算すれば､簡単に ﾄﾚｰｽ 出来る｡
強い光に順応すると､光合成器官のコンフォメーションが大きく変わるため､エネルギーが反応センターに届く前に､PSIIアンテナ内で非光化学的なエネルギーの散逸が起こる｡この影響を見逃すと､光化学的と非光科学的エネルギー消費の相対的貢献度の計算に誤差を生じる｡この問題の解決には､一時期サンプルを覆い､遠赤光源を使って､PSIIよりPSIを優先的に励起する；電子が､電子伝達鎖を通して流れ､PSII反応センターが効果的に"opening"されるので､通常Fo'として表される､光順応のFoの測定が出来る｡このφPSIIR 機能は､その測定を行う為に､次の一連の ｲﾍﾞﾝﾄ を始める：
2. 定常状態の蛍光値 (Fs)は､通常光下の蛍光信号を平均して決める｡
3. "Pulse" edit boxで決めた時間と強度の飽和パルスを照射し､連続した高い値の平均として､Fm'値が 記録 される｡
4. パルス照射して3秒間後に､（FMSの作用光源が自動的にoffされて）サンプルを何かで覆い暗順応させ､5秒間 遠赤外パルスを宛てる｡
5. 遠赤外パルス照射中の､蛍光の降下が追跡され､最小収量がFo' として 記録 される｡
2.6.3.2.3 Fs Function
φPSII とφPSIIR 機能が働いているときは､定常状態蛍光収量 (Fs) は､自動的に測定される｡ 然し､飽和 パルスを照射しないで､Fs値を記録したい場合もある｡ その時は､"Fs" 測定機能を ｸﾘｯｸ する｡その後1.6秒間のﾃﾞｰﾀ が平均され､"Parameters Window"にFsとして表示される｡
Fo'の測定は､"Fo'" ﾎﾞﾀﾝ の操作で､φPSIIR 機能とは関係なく行える｡ｱｸﾃｲﾌﾞ にすると､作用光がoffにされ､5秒間遠赤外光が照射され､その蛍光の減少が追跡される｡その最小値が､Fo' として"Parameters Window"に表示される｡遠赤外パルスが消えると､作用光が､元のセッティング値で､再び on される｡
2.6.3.2.5 Logging PAR and Temperature
ﾂｰﾙ ﾊﾞｰ の"PAR"と"Temp"機能で､照射PPFDと ｻﾝﾌﾟﾙ 上の温度が測れる｡本機の モニタリング バーに出る最後の測定値が､パラメータウインドに表示される｡従って､本機の モニタリングバー の表示がアクテイブであることが大切である。値０は、リーフクリップの付いていないことを意味している｡
本機のツールバーの残りのボタンは、外部装置のインターフエイスと、ユーザーの指定する
イベントマーカーの制御に使う。
2.6.4.1 External Control Interface
FMS1には、他の会社の製品の制御インターフエイスのためのデジタル制御インターフエイスが付いている。実験中でも"O/P"ボタン或いはスクリプト中のDIGT エレメントを使って、本機のツールバーから直接ライン０に繋がっている外部装置をトリガー出来る｡FMSと平行して､蛍光以外の事象を記録する外部装置をトリガーするのに適する｡逆に､FMSは､外部装置からの制御に応答して作動する､4つ迄の ﾃﾞｼﾞﾀﾙ 入力が受けられる｡入力 ﾗｲﾝ 0と1の状態は､手動操作の時は､本機の モニタリングバーに示されるので､WDON, WOFF エレメントで停止しているスクリプトを進行させることが出来る｡種々の電圧制御(0から4095 mV)の要る､外部LED光源の様な装置の制御用に､D/A ﾗｲﾝ も付いている｡D/A ﾗｲﾝ は､"DAC" ﾎﾞﾀﾝ でon/offを切り替えることが出来､スクリプト 実行中も､希望の電圧をエレメントパラメーターとして､DACエレメントで制御出来る。
注意：０のDAC値で、チャンネルは off される｡
DACやﾃﾞｼﾞﾀﾙ 制御 ﾗｲﾝ を使うには､適当な機器間の接続が必要である｡FMSの ﾋﾟﾝ 接続は､補足 Bの第1章に在る｡Hansatechより端子のついてない接続用ケーブルを手に入れることができる。
データの記録中、FMSの制御する光照射開始はすべて、色分け矢印でマーキングされる。本機のツールバーの"↑"と"↓"ボタンで、除草剤の添加とか温度の変化等のユーザーの特定する事象のマーキングが出来る。どちらかのイベントマーカーボタンを使う度に、矢印がデータ記録部分の上に出て、表式出力の対応する蛍光データが、訂正し易い様に色分けされる。色分けは、個々の応用に適する様に、自由に決められる｡
補足 A
Hansatech Scripting Language Elements
合計32の スクリプトエレメントが､HSLを構成する｡この補足は次のことを記している。
機器制御エレメント： 機器制御と光源のセット、データは記録しない。
スクリプトポーズエレメント
条件が満たされる迄､ｽｸﾘﾌﾟﾄ の実行が中断される｡
LOG機能は、ポーズ中でも、フルトレース分析のデータを記録する様にシステムをセットする。
トレース記録エレメン
サンプルが置かれている状況と、そのトレースに関連する基本的パラメーターを記録するためPAR/temperatureリーフクリップと併せて使用する｡
一般に､クロロフイル蛍光パラメーターとして用いられる値を、自動的に測定、計算し、記録する。